Analiz sa a sou pwoblèm posib nanBukalprelèvman/FTA card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.

Kolòn pou pirifye a bouche

Nan twous sa a, nan operasyon ekstraksyon ADN jenomik la, kolòn pirifikasyon an dirèkteman adsorbed sou echantiyon liz anzimatik melanj san etap santrifujasyon an, epi kolòn pirifikasyon an ka bloke akòz enzymizasyon enkonplè ak gwo viskozite echantiyon an.

Kòz posib sa yo se jan sa a:

1. Enkonplè dijesyon anzimatik nan echantiyon tisi.

Rekòmandasyon: Tan pwosesis echantiyon Foregene Protease ka pwolonje kòmsadwa oswa sipènatant la ka pran apre santrifujasyon nan 12,000 rpm (~13,400).× g) pou 5 min.

2. Twòp itilizasyon echantiyon tisi oswa tisi gwo.

Rekòmandasyon: Li pi bon pou pa depase 1Bukal prelèvman nan echantiyon an;si echantiyon an twò gwo, ogmante dòz tanpon ST1, Foregene Protease, tanpon ST2 kòmsadwa.

3. Viskozite echantiyon an twò wo.

Rekòmandasyon: Echantiyon yo ka dilye kòmsadwa avèk 10 mM Tris-HCl anvan ekstraksyon ADN jenomik.

4. Fragman kat san yo te aspire.

Rekòmandasyon: Tan santrifujasyon pasajè etap 6 nan ekstraksyon jenomik tach san (FTA Card) ka pwolonje yon fason ki apwopriye.

Sede ki ba oswa pa gen ADN

Gen souvan yon varyete de faktè ki afekte pwodiksyon ADN jenomik, ki gen ladan orijin echantiyon, kondisyon depo echantiyon, preparasyon echantiyon, manipilasyon, elatriye.

ADN jenomik pa ka jwenn pandan ekstraksyon

Kòz posib yo se jan sa a:

1. Move prezèvasyon echantiyon oswa depo pou twò lontan mennen nan degradasyon ADN jenomik.

Rekòmandasyon: Prelèvman oral yo ta dwe fèk pran echantiyon, epi li pa rekòmande pou itilize prelèvman konsève pou operasyon ekstraksyon ADN jenomik;echantiyon tach san yo ta dwe asire ke bon jan kalite a kalifye ak tan an depo pa ta dwe twò lontan.

2. Twòp tisi itilizasyon ka lakòz okenn ekstraksyon ADN jenomik ki koresponn lan.

Rekòmandasyon: Swiv labuccal enstriksyon echantiyon prelèvman nan gid operasyon an, epi siye anpil fwa ke posib pou ase selil yo ka tache ak prelèvman oral la pou fè ekstraksyon ADN jenomik;pou fè ekstraksyon echantiyon tach san, zòn nan koupe tach san ka yon fason apwopriye ogmante.

3. Foregene Protease mal konsève, sa ki lakòz yon diminisyon nan aktivite li oswa inaktivasyon.

Rekòmandasyon: Konfime kondisyon yo depo nanForegene Protease oswa ranplase li ak yon nouvo Foregene Protease pou reyaksyon anzimatik.

4. Konsèvasyon move twous la oswa tan depo twò lontan, sa ki lakòz echèk kèk eleman nan twous la.

Rekòmandasyon: Achte yon nouvoBukal prelèvman ADNan karantèn twous pou pwosedi ki gen rapò.

5. Tanpon WB pa ajoute etanòl absoli.

Rekòmandasyon: Konfime ke tanpon WB ajoute volim ki kòrèk la nan etanòl absoli.

6. Eluent a pa kòrèkteman ajoute nan fim nan silikone.

Rekòmandasyon: Ajoute 65°Cpre-chofe eluyan gout nan mitan an nan manbràn silikone a epi kite nan tanperati chanm pou 5 min ogmante efikasite elisyon an.

LOw-yield ADN jenomik izole

Kòz posib sa yo se jan sa a:

1. Move prezèvasyon echantiyon oswa depo pou twò lontan mennen nan degradasyon ADN jenomik.

Rekòmandasyon: Prelèvman oral yo ta dwe fèk pran echantiyon, epi yo pa ta dwe itilize prelèvman konsève pou fè ekstraksyon ADN jenomik.

2. Si kantite echantiyon tisi a twò piti, kontni ADN jenomik ekstrè a pral mwens.

Rekòmandasyon: Swiv enstriksyon echantiyon prelèvman oral yo nan gid fonksyònman an, siye anpil fwa ke posib pou ase selil yo ka tache ak prelèvman oral la pou fè ekstraksyon ADN jenomik.

3. Foregene Protease mal konsève, sa ki lakòz yon diminisyon nan aktivite li oswa inaktivasyon.

Rekòmandasyon: Konfime kondisyon yo depo nanthe Foregene Protease oswa ranplase li ak yon nouvo Foregene Protease pou reyaksyon anzimatik.

4. Pwoblèm Eluent.

Rekòmandasyon: Sèvi ak tanpon EB pou elisyon;si w ap itilize ddH₂O oswa lòt eluyan, konfime ke pH eluate a se ant 7.0-8.5.

5. Eluate a pa kòrèkteman ajoute gout.

Rekòmandasyon: Ajoute gout eluyan nan mitan manbràn silikone a epi kite nan tanperati chanm pou 5 minit pou ogmante efikasite elisyon.

6. Likid elisyon an akimile twò piti.

Rekòmandasyon: Sèvi ak eluyan pou elisyon ADN jenomik jan sa nesesè nan enstriksyon yo, omwenpa mwens pase 15μl.

Low pite of ADN jenomikizole

Pite ADN genomik ki ba ka mennen nan echèk oswa rezilta satisfezan nan eksperyans en, tankou: anzim pa ka koupe louvri, PCR pa ka jwenn fragman nan jèn nan enterè, elatriye.

Kòz posib yo se jan sa a:

1. Polisyon eteroprotein, polisyon RNA.

Analiz: Kolòn pou pirifye a pa te lave lè l sèvi avèk tanpon PW;kolòn pou pirifye lave tanpon PW la pa te lave lè l sèvi avèk vitès santrifujeur kòrèk la.

Rekòmandasyon: Asire w ke pa gen presipitasyon nan supernatant la anvan ou ajoute etanòl;asire w ke ou lave kolòn pou pirifye a dapre enstriksyon yo, epi etap sa a pa ka omisyon.

2. Enpurte ion polisyon.

Analiz: Kolòn pou pirifye lave tanpon WB te omisyon oswa lave sèlman yon fwa, sa ki lakòz kontaminasyon iyonik rezidyèl.

Rekòmandasyon: Asire w ke w lave Buffer WB 2 fwa jan yo di l pou retire iyon rezidyèl yo otank posib.

3. RNA anzim kontaminasyon.

Analiz: RNases etranje yo te ajoute nan tanpon;Operasyon lave tanpon PW pa te kòrèk, sa ki lakòz résidus RNase, ki afekte operasyon eksperimantal RNA en, tankou transkripsyon vitro.

Rekòmandasyon: Foregene seri asid nikleyikizoletwous ka retire RNA san adisyon adisyonèl nan RNase,konsa twous izolasyon ADN prelèvman bouch/FTA Katbezwen't ajoute RNase;asire w ke ou swiv enstriksyon yo pou kolòn pou pirifye lave tanpon PW, epi etap sa a pa ka omisyon.

4. Etanòl rezidi.

Analiz: Tanpon WB pa t 'fè santrifujasyon tib vid apre lave kolòn nan pirifikasyon.

Rekòmandasyon: Fè operasyon santrifujasyon tib vid ki kòrèk la dapre enstriksyon yo.

5. Lòt polisyon enpurte.

Analiz: Echantiyon sove oswa echantiyon espesyal yo pa pretrete.

Rekòmandasyon: Byen trete echantiyon an jan yo mande yo.