1: Ranplase founiti eksperimantal yo nan tan

Mete kanpe (NTC) kontwòl negatif epi repete li anpil fwa.Yon fwa yo jwenn ke gen kontaminasyon pwodwi PCR nan laboratwa a, ranplase tout founiti eksperimantal nan tan.Tankou: re-delye epi prepare primè yo, re-esterilize pwent pipèt la, tib EP, ddH2O, elatriye, ranplase ak yon nouvo pipèt, epi tanporèman prete lòt laboratwa pou fè eksperyans PCR.Laboratwa ki kontamine a dwe vantile ak iradyasyon ak reyon iltravyolèt jiskaske kontaminasyon pwodwi PCR la elimine anvan ou kontinye ak eksperyans la.

2: Pwolonje tan ekspoze UV

Li se vo anyen ke yo retire kontaminasyon ADN, radyasyon iltravyolèt regilye yo ta dwe pwolonje pa 2 èdtan pase nòmal.Menm si sa, efè UV irradiation sou retire ti fragman (pi ba pase 200bp) kontaminasyon DNA toujou pa bon.

Longèdonn iltravyolèt (nm) se jeneralman 254/300nm, epi li ase yo iradyasyon pou 30 minit.Li ta dwe remake ke lè w ap chwazi UV elimine kontaminasyon nan pwodwi PCR rezidyèl, yo ta dwe konsidere longè pwodwi PCR la ak distribisyon baz nan sekans pwodwi a.UV iradyasyon se sèlman efikas pou fragman long ki pi wo a 500 bp, epi li gen ti efè sou fragman kout.

Pandan iradyasyon UV, baz pirimidin yo nan pwodwi PCR la pral fòme dimè.Dimè sa yo ka mete fen nan ekstansyon an, men se pa tout pirimidin nan chèn ADN ki ka fòme dimè, ak iradyasyon UV ka kraze tou dimè yo..Degre fòmasyon dimè depann sou longèdonn UV, ki kalite dimè pirimidin ak sekans nukleotid adjasan sit dimè a.Se poutèt sa, si fragman anplifye PCR yo piti, li rekòmande pou itilize sistèm kontaminasyon pwodwi UNG anti-PCR.

3: ADN polisyon ki pi souvan itilize

Ayewosòl yo fasil pwodwi lè yo ajoute pipèt, ki difisil pou evite, epi li pral rezoud byen vit.Se poutèt sa, li se san dout yon bon chwa pou itilize souvan polisyon ADN espesyal pou anpeche pwopagasyon polisyon ADN.

4: Sèvi ak UNG sistèm anti-polisyon

Apre yo fin retire kontaminasyon pwodwi PCR la, laboratwa tès la ka itilize sistèm kontaminasyon pwodwi UNG anti-PCR pou anpeche kontaminasyon pwodwi PCR.Nan laboratwa jeneral, ou ka fè patisyon eksperimantal senp, estrikteman separe zòn pwodwi PCR nan lòt zòn, etabli sèten règ ak règleman laboratwa, epi fè fòmasyon ki enpòtan pou anpeche kontaminasyon pwodwi PCR la.

Rekòmandasyon: Etabli yon laboratwa PCR rezonab, kenbe yon bon anviwònman PCR, fòmile pwosedi operasyon PCR estanda, ak kiltive konsyans fonksyònman solid eksperimantè yo se kle yo anpeche oswa diminye polisyon nan eksperyans PCR.