Nan dis ane ki sot pase yo, teknoloji koreksyon jèn ki baze sou CRISPR te devlope rapidman, e li te aplike avèk siksè nan tretman maladi jenetik ak kansè nan esè klinik imen.An menm tan an, syantis atravè mond lan yo toujou ap tape nouvo zouti nouvo ak potansyèl koreksyon jèn yo rezoud pwoblèm yo nan zouti koreksyon jèn ki deja egziste ak desizif.

Nan mwa septanm 2021, ekip Zhang Feng te pibliye yon papye nan jounal Syans [1], e li te jwenn ke yon pakèt transposters te kode anzim asid nikleik RNA gide epi yo te rele l Omega sistèm (ki gen ladan ISCB, ISRB, TNP8).Etid la te jwenn tou ke sistèm Omega itilize yon seksyon RNA pou gide koupe ADN doub chèn, sètadi ωRNA.Sa ki pi enpòtan, anzim asid nikleyik sa yo piti anpil, se sèlman apeprè 30% nan CAS9, ki vle di ke yo ka gen plis chans pou yo delivre nan selil yo.

Nan dat 12 oktòb 2022, ekip Zhang Feng te pibliye nan jounal Nature ki rele: Structure of the Omega Nickase ISRB in Complex with ωrna and Target DNA [2].

Etid la analize plis estrikti mikwoskòp elèktron jele ISRB-ωRNA ak konplèks ADN sib nan sistèm Omega.

ISCB se zansèt CAS9, ak ISRB se menm objè a nan mank HNH domèn asid nikleyè ISCB, kidonk gwosè a pi piti, se sèlman apeprè 350 asid amine.ADN tou bay fondasyon pou plis devlopman ak transfòmasyon jeni.

IsrB ki gide RNA se yon manm fanmi OMEGA kode pa superfami IS200/IS605 transposon yo.Soti nan analiz filojenetik ak pataje domèn inik, IsrB gen anpil chans pou yo précurseur nan IscB, ki se zansèt Cas9 la.

Nan mwa me 2022, Cornell University's Lovely Dragon Laboratory te pibliye yon papye nan jounal Science [3], analize estrikti IscB-ωRNA ak mekanis li koupe ADN.

Konpare ak IscB ak Cas9, IsrB manke domèn nukleaz HNH, lòb REC, ak pi fò nan domèn sekans PAM ki entèraksyon, kidonk IsrB pi piti anpil pase Cas9 (sèlman apeprè 350 asid amine).Sepandan, ti gwosè IsrB balanse pa yon RNA gid relativman gwo (omega RNA li yo apeprè 300 nt long).

Ekip Zhang Feng a analize estrikti mikwoskòp kriyo-elektron IsrB (DtIsrB) ki soti nan bakteri anaerobik Desulfovirgula thermocuniculi ak chalè imid ak ADN sib li yo.Analiz estriktirèl te montre ke estrikti an jeneral nan pwoteyin IsrB pataje yon estrikti zo rèl do ak pwoteyin Cas9.

Men, diferans lan se ke Cas9 sèvi ak lòb REC la pou fasilite rekonesans sib, pandan y ap IsrB depann sou ωRNA li yo, yon pati nan ki fòme yon estrikti konplèks ki genyen twa dimansyon ki aji tankou REC.

Pou pi byen konprann chanjman estriktirèl IsrB ak Cas9 pandan evolisyon RuvC, ekip Zhang Feng te konpare estrikti sib DNA-obligatwa RuvC (TtRuvC), IsrB, CjCas9 ak SpCas9 soti nan Thermus thermophilus.

Analiz estriktirèl IsrB ak ωRNA li yo klarifye ki jan IsrB-ωRNA ansanm rekonèt ak cleaves sib ADN, epi tou li bay yon baz pou plis devlopman ak jeni nan nukleaz miniaturized sa a.Konparezon ak lòt sistèm gide RNA mete aksan sou entèraksyon fonksyonèl ant pwoteyin ak RNAs, avanse konpreyansyon nou sou byoloji a ak evolisyon nan divès sistèm sa yo.

Lyen:

1.https://www.science.org/doi/10.1126/science.abj6856

2.https://www.science.org/doi/10.1126/science.abq7220

3.https://www.nature.com/articles/s41586-022-05324-6