• facebook
  • linkedin
  • youtube

PCR machin|Èske w vrèman konprann?

Teknoloji PCR ki te genyen pri Nobel

An 1993, syantifik Ameriken Mulis te resevwa Pri Nobèl nan Chimi, ak reyalizasyon li te envansyon nan teknoloji PCR.Majik la nan teknoloji PCR se nan karakteristik sa yo: Premyèman, kantite ADN yo dwe anplifye trè piti, epi teyorikman yon sèl molekil ka itilize pou anplifikasyon;Dezyèmman, efikasite anplifikasyon an wo, epi kantite jèn sib la se eksponansyèl.Anplifikasyon, plis pase 10 milyon fwa nan kèk èdtan.Koulye a, enstriman PCR la te lajman itilize nan rechèch syans lavi ak anpil lòt aspè.

Diferan modèl ak manifaktirè tèmik cyclers ka montre diferan pèfòmans ak repetibilite.Diferans sa yo afekte pa sèlman efikasite PCR, men tou presizyon ak konsistans done yo jwenn.Konprann karakteristik machin PCR ka ede nou maksimize siksè eksperyans nou yo.

Modil chofaj

Presizyon nan tanperati a nan sikilasyon an tèmik ka desizif pou siksè oswa echèk nan PCR.Konsistans tanperati byen-a-byen sou blòk chofaj la enpòtan tou pou jwenn rezilta PCR serye ak repwodiktif.

Youn nan fason yo asire presizyon tèmik se fè tès souvan lè l sèvi avèk twous verifikasyon tanperati ak rekalibrasyon jan sa nesesè pa yon pwofesyonèl ki resevwa fòmasyon.Tès verifikasyon tanperati yo anjeneral itilize pou:

Byen-a-byen presizyon relatif nan mete tanperati nan mòd izotèmik

Byen-a-byen presizyon relatif nan mete tanperati apre konvèsyon tanperati

Kouvèti Chalè Tanperati Presizyon

konprann 1

Jadendanfan Recuit Tanperati Kontwòl

Kontwòl tanperati gradyan se yon fonksyon nan enstriman an PCR ki fasilite optimize nan rkwir Jadendanfan nan PCR.Objektif anviwònman gradyan an se reyalize tanperati varye ant modil yo, epi pa ≥2 °C monte ak tonbe nan mitan chak kolòn, diferan tanperati yo ka teste ansanm pou jwenn pi bon tanperati rkwir Jadendanfan an.Teyorikman, yon gradyan vre reyalize tanperati lineyè ant modil yo.

Sepandan, siklis tèmik gradyan konvansyonèl yo anjeneral anplwaye yon sèl blòk tèmik ak kontwòl tanperati atravè de eleman chofaj ak refwadisman ki sitiye nan tou de bout, souvan sa ki lakòz limit sa yo:

Se sèlman de tanperati ka mete: tanperati ki wo ak ba yo pou rkwir Jadendanfan yo mete nan tou de bout nan modil la tèmik, ak anviwònman egzak nan lòt tanperati pa ka reyalize ant modil.

Akòz echanj chalè ant kolòn diferan yo, tanperati a ant diferan rejyon sou modil la gen plis chans pou swiv yon koub sigmoidal olye ke yon gradyan lineyè vre.

konprann2

Tanperati echantiyon

Kapasite tèmik sikilasyon an pou kontwole tanperati echantiyon an trè enpòtan pou presizyon rezilta PCR yo.Paramèt espesifik enstriman yo tankou pousantaj ranp, tan kenbe, ak algoritm yo enpòtan anpil pou predi tanperati echantiyon.

Pousantaj nan chofaj ak refwadisman nan machin PCR la vle di ke tanperati a chanje ant etap PCR ki rive sou yon sèten peryòd tan.Depi li pran yon sèten kantite tan pou chalè a transfere soti nan modil la nan echantiyon an, aktyèl chofaj ak refwadisman pousantaj echantiyon an pral pi dousman.Se poutèt sa, definisyon an nan vitès chanjman tanperati bezwen yo dwe distenge ak konprann.

Pousantaj ranp modil maksimòm oswa pik la reprezante chanjman tanperati ki pi rapid ke modil la ka reyalize sou yon ti peryòd tan pandan ranp lan.

Pousantaj mwayèn ranp blòk la reprezante to chanjman tanperati a sou yon peryòd tan ki pi long epi li pral bay yon mezi pi reprezantatif nan vitès machin PCR.

Echantiyon maksimòm chofaj ak refwadisman pousantaj ak echantiyon mwayèn chofaj ak refwadisman yo reflete tanperati aktyèl echantiyon an.Pousantaj echantiyon chofaj ak refwadisman pral bay yon konparezon pi egzak sou pèfòmans machin PCR la ak enpak potansyèl li sou rezilta PCR yo.

Lè w ap fè yon ranplasman cycler, li rekòmande pou itilize yon enstriman ki gen yon pwogram pousantaj ranp ki similye mòd anvan an pou ranplasman pi fasil ak enpak minim sou repetibilite PCR.

konprann3

Siklis tèmik la ta dwe fèt nan etap tan sèlman apre echantiyon an rive nan tanperati a mete.Nan fason sa a, tan an ke echantiyon an kenbe nan tanperati a mete yo pral pi byen konsève ak kondisyon ki korespondan sik ki nesesè nan pwosedi a opere.

Siklis tèmik souvan itilize algoritm matematik konplèks pou asire ke echantiyon yo ka byen vit rive nan yon tanperati fikse dapre yon pwogram prereglaj.Ki baze sou volim nan sistèm reyaksyon an ak epesè nan plastik PCR yo itilize, algorithm la ka predi tanperati echantiyon an ak tan li pral pran pou rive nan tanperati a mete.Repoze sou algoritm sa yo, pandan pwosesis chofaj oswa refwadisman sikilasyon tèmik la, tanperati blòk la anjeneral depase valè a mete atravè yon pwosesis ki rele tèmik blòk overshoot oswa undershoot.Tankou yon konfigirasyon asire ke echantiyon an rive nan tanperati a mete pi vit ke posib san yo pa depase oswa undershooting tèt li.

Debi eksperimantal

Faktè ki ka ogmante debi a nan yon sikilasyon tèmik gen ladan pousantaj ranp, konfigirasyon blòk tèmik, ak entegrasyon nan platfòm automatisation.

Pousantaj chofaj ak refwadisman tèmik sikilasyon an reprezante vitès kote li rive nan tanperati a.Pi vit monte tanperati a ak tonbe, pi vit PCR a ap kouri, ki vle di ke plis eksperyans ka ranpli nan yon peryòd tan bay yo.Anplis de sa, eksperyans yo ka akselere lè w itilize ADN polymerases pi vit.

konprann4

Konsepsyon modil tèmik sikilasyon an enpòtan tou pou eksperyans PCR.Pou egzanp, modil ranplase pèmèt fleksibilite nan kantite echantiyon pou chak kouri.Anplis de sa, modil chofaj ak modil kontwole endividyèlman yo ideyal pou kouri diferan pwogram PCR ansanm sou yon sèl sikilasyon tèmik.

konprann5

Pou PCR otomatik ki wo-debi, lojisyèl ki kontwole sistèm manyen pipet la ta dwe pwogramasyon ak konpatib.Sistèm otomatik yo ideyal pou fè reyaksyon PCR gwo debi paske yo ka kouri kontinyèlman ak ti entèvansyon imen, kidonk minimize tan ki nesesè pou konfigirasyon manyèl eksperimantal ak ogmante kantite reyaksyon nan yon peryòd tan bay yo.

Reliability, Durability ak Asirans Kalite nan siklis tèmik

Anplis de pèfòmans ak kapasite debi, machin PCR la ta dwe kapab kenbe tèt ak sèten itilizasyon repete, estrès nan anviwònman an, ak kondisyon anbake.Gen kèk manifakti ki ka rapòte sou fason enstriman an fè tès fyab ak rezistans.Deteksyon enstriman PCR ki koresponn lan gen ladan:

Fyab: Yo itilize machin mekanik pou fè tès repete sou eleman enstriman yo itilize souvan tankou kouvèti tèmik, panno kontwòl / ekran tactile, ak modil monte bisiklèt tanperati.

Presyon anbyen: Chanm anviwònman yo ka itilize pou simulation diferan kondisyon eksperyans woutin, tankou tanperati, imidite.

Tès Shipping: Tès entans chòk ak Vibration ka fèt dapre estanda Asosyasyon Shipping Sekirite Entènasyonal pou asire enstriman an ka rive nan kondisyon fonksyònman san domaj.

konprann6

Garanti ak sèvis pou kenbe machin nan PCR

Malgre tès solid pou fyab ak rezistans, siklis tèmik inevitableman gen pwoblèm teknik sou lavi enstriman an.Pou lapè nan tèt ou, yo ta dwe konsidere garanti manifakti a, sèvis, ak antretyen lè w ap achte yon enstriman.

Fleksibilite nan sèvis tankou antretyen sou plas/retounen nan faktori, sèvis siveyans aleka, ak enstriman ranplasman nan pwosesis antretyen an, elatriye, diminye enpak la sou efikasite travay.

Longè peryòd garanti a, tan an nan sèvis la, aksè nan sipò teknik, ak konpetans yo nan pèsonèl sipò pwofesyonèl.

Posibilite enstalasyon enstriman, operasyon, koperasyon, ak verifikasyon pou satisfè kondisyon laboratwa ak regilasyon ki gen rapò.Sèvis antretyen tankou verifikasyon tanperati, tès, ak kalibrasyon yo disponib pou asire ke enstriman an fè byen ak paramèt korespondan yo.

Pwodwi ki gen rapò:

konprann7konprann8


Tan poste: Oct-18-2022