Tès laboratwa kòmanse ak koleksyon echantiyon, epi koleksyon echantiyon se pi fasil pou neglije.Bagay ki pi enpòtan pou koleksyon echantiyon an se chwazi kalite echantiyon ki kòrèk la, sèvi ak zouti echantiyon apwopriye, epi fè transpò ak pwosesis rezonab.

I.Sample tip

Kalite echantiyon komen yo se jan sa a:

Metòd echantiyon an ka refere a espesifikasyon teknik yo pou siveyans anviwònman nouvo kowonaviris yo nan mache komès agrikòl (baza) ":

1. Echantiyon prelèvman nan gòj, men, rad ak lòt objè nan pratikan: li oblije sèvi ak solisyon an prezèvasyon viris nan tib echantiyon viris la ak konplètman enfiltre echantiyon koton echantiyon yo.Sifas tè a) repete aplike epi rense pou plis pase 3 fwa.An menm tan an, li nesesè pou fè echantiyon milti-pwen distribye sou sifas objè echantiyon an.

2. Echantiyon prelèvman sifas manje: echantiyon manje yo pa ka kolekte dirèkteman.Yo ta dwe separe manje a ak anpil atansyon epi estoke nan yon sache pwòp echantiyon anvan yo kolekte echantiyon prelèvman.Li oblije sèvi ak solisyon an prezèvasyon viris nan tib echantiyon viris la, apre yo fin konplètman tranpe echantiyon an koton prelèvman, repete fwote epi rense sifas echantiyon manje a yo dwe kolekte plis pase 3 fwa.An menm tan an, li nesesè pou fè echantiyon milti-pwen distribye sou sifas echantiyon an.

3. Echantiyon dlo egou: Dapre distribisyon sistèm drenaj la nan mache a, chwazi 2-3 kote echantiyon dlo egou yo, konsantre sou koleksyon rezo tiyo entèn yo, en direksyon koule dlo a, oswa koneksyon an ak rezo tiyo minisipal la.Pou kolekte yon echantiyon prelèvman, plonje li nan dlo egou a ak yon prelèvman koton echantiyon pou fè li adsorbe dlo egou a epi rense l nan tib echantiyon an plis pase 3 fwa.Pou kolekte echantiyon dlo egou, sèvi ak boutèy plastik polyethylene pou kolekte echantiyon dlo egou 30-500 mL;pou koleksyon dlo egou ak yon volim ki pi gran pase 500 mL, yo ka itilize bokit plastik polyethylene oswa echantiyon dlo sou plas ekipman anrichisman espesyal.An menm tan an, li nesesè pou fè echantiyon milti-pwen distribye pou kote echantiyonaj dlo egou yo.

4. Echantiyon bèt: Pou bèt vivan, yo ka itilize echantiyon echantiyon yo pou kolekte prelèvman sifas kò a, prelèvman oropharyngeal ak prelèvman nan dèyè, ak echantiyon ekskreman oswa sekresyon yo kapab tou kolekte epi anrejistre kòmsadwa sou fèy dosye a.Pou echantiyon bèt ki te sibi po, elatriye, sèvi ak koton prelèvman pou kolekte sifas kò yo ak echantiyon prelèvman kavite kò yo.Li oblije sèvi ak solisyon an prezèvasyon viris nan tib echantiyon viris la konplètman enfiltre echantiyon koton echantiyon an, ak Lè sa a, repete aplikasyon an nan sifas la nan echantiyon an manje yo dwe kolekte.Shabu plis pase 3 fwa.An menm tan an, li nesesè pou fè echantiyon milti-pwen distribye sou sifas echantiyon an.

5. Lòt aparèy: resipyan pou transpòte ak elvaj bèt tankou kaj oswa tank pwason.Premyèman, obsève oswa konprann kalite espesifik bèt ki estoke ak elve nan veso a, epi kolekte echantiyon prelèvman sou miray enteryè veso a oswa echantiyon likid nan kontni an.

6. Kolekte echantiyon aerosol nan zòn kote moun rasanble, zòn komès lokal yo mal ayere, biwo, ak chanm repo.

II.Sampling zouti
1. Tib koleksyon san
Si ou bezwen fè tès asid nikleyik ak echantiyon antikoagulan pita, li rekòmande pou itilize yon veso san vakyòm ki gen anticoagulant EDTA pou kolekte san;pou echantiyon serom, li rekòmande yo sèvi ak yon veso san vakyòm san antikoagulan.

2. Prelèvman echantiyon

Li rekòmande pou sèvi ak tijyon polypropylène olye pou yo tach aljinat kalsyòm oswa tij ak poto an bwa, paske yo ka gen sibstans ki inaktive sèten viris ak anpeche tès PCR.Échantillons ak tèt koton pa ka sèvi ak, paske koton fibres gen yon gwo adsorption de protéines Et sont pa fasil élution nan solisyon préservation ki vin apre.

Nan "Specifikasyon Teknik pou Koleksyon Melanje 10-an-1 ak Deteksyon Nouvo Asid Nukleik Coronavirus", li klèman make ke "Prelèvman echantiyon an ta dwe fèt ak Polyester, nilon ak lòt materyèl ki pa koton ak ki pa kalsyòm aljinat, epi manch lan ta dwe fèt ak materyèl ki pa bwa.Pwen kraze a se apeprè 3 cm soti nan tèt la nan tèt prelèvman, ki fasil pou kraze.

CDC Ozetazini te mansyone tou "Sèvi ak ti prelèvman fib sentetik ak plastik oswa fil elektrik.Pa sèvi ak prelèvman aljinat kalsyòm oswa prelèv ak rasin an bwa,kòm yo ka gen sibstans ki inaktive kèk viris ak anpeche tès PCR.

Kounye a lajman itilize se yon jetab nilon esteril flokaj prelèvman konbine avèk yon baton plastik.Prelèvman flokaj la gen pi bon absòpsyon dlo ak pousantaj lage.Dapre diferan sit echantiyon, tèt la prelèvman tou gen diferan gwosè ak fib.Epesè a.”

3. Egzanp solisyon prezèvasyon transpò

Solisyon prezèvasyon inaktivasyon viris: yon kantite lajan apwopriye nan konsantrasyon sèl guanidine ak yon varyete konpozan viris liz ka dirèkteman lize viris la lage asid nikleyik, inaktive RNase ak DNase, epi asire entegrite nan asid nikleyik, ki ka itilize pou deteksyon qPCR ki vin apre.Li pa ka itilize pou kiltivasyon viris ak izolasyon.

Viris transpò ak solisyon prezèvasyon: gen sèl, asid amine, vitamin, glikoz ak pwoteyin ki nesesè pou siviv viris la, ki ka kenbe aktivite viris la.Li ka itilize pou fè ekstraksyon asid nikleyik ak deteksyon viris la nan tan kap vini an, epi li kapab tou itilize pou kiltivasyon ak separasyon viris la.

4. Tib prezèvasyon echantiyon ak sak echantiyon

Tib depo echantiyon an ta dwe yon tib plastik esteril ak yon bouchon vis ki pa absòbe asid nikleyik.Chak tib echantiyon yo ta dwe kouvri ak yon sak echantiyon pou anpeche flit ak kontaminasyon echantiyon an.

III.Sibstans entèfere nan echantiyon an

Sibstans entèfere nan eksperyans PCR

1. andojèn entèferans

Sibstans ki prezan nan echantiyon kò a ka entèfere ak deteksyon lòt sibstans.

San:heme (> 1mg / ml), hemin (> 0.1ng / μl), trigliserid, IgG, elatriye;

Pipi:Ure (20mM);

Poupou:plant polisakarid, kolat;

Tisi:proteaz, kolagen an;

Lèt: proteaz, ion kalsyòm;

Dwòg: antibyotik, dwòg antiviral, òmòn, elatriye.

lòt.

2. ekzogène entèferans

Li soti nan sibstans ki ka entèfere ak deteksyon an nan lòt sibstans nan vitro.Egzanp aditif ak sibstans ki ka kontakte pandan koleksyon echantiyon ak pwosesis:

Pwovizyon pou tès yo: jèl separasyon serom, veso koleksyon echantiyon ak bouchon kawotchou, katetè, likid flòch katetè, poud gan, elatriye.

Antikoagulant: eparin (> 0.1 U / mL), EDTA (> 0.5 mM), elatriye;

Solvang òganik: izopropanol (> 0.1 IU / ml), betain, dimethyl sulfoxide, formamid, gliserin, PEG, elatriye;

Dezenfektan: alkòl (etanòl> 1%), aldeid, fenol (fenol> 0.2%), oksijene, asid fò (HCL), alkali fò (NaOH), elatriye;

Detèjan:SDS (> 0.005%);

Tè: tero

Dyestuff: Indigo

lòt.

Anba kondisyon aktyèl echantiyon deyò, tankou kolekte echantiyon anviwònman an, echantiyon yo ka genyen yon varyete de sibstans entèfere, ak konpozisyon sibstans entèfere nan chak kote diferan, ki mande pou eksperyans entèferans PCR yo dwe te pote selon kondisyon lokal yo.

IV.Egzanp depo ak kondisyon transpò

Yo ta dwe voye echantiyon klinik ki fèk kolekte nan laboratwa a nan 2 a 4 èdtan apre yo fin kolekte nan 2°C a 8°C.Sere nan 4 ℃ nan 24 èdtan.Espesimèn yo itilize pou izòlman viris ak deteksyon asid nikleyik yo ta dwe teste pi vit ke posib.Espesimèn ki ka teste nan 24 èdtan yo ka estoke nan 4 ° C;espesimèn ki pa ka detekte nan 24 èdtan yo ta dwe estoke nan -70 °C oswa pi ba (si se pa sa- Estoke nan 70 °C nan yon frijidè nan -20 °C).

Rezime:Koleksyon estanda, transpò ak depo echantiyon yo esansyèl pou tès ki vin apre yo.Fo negatif anpil tès laboratwa yo koze pa move koleksyon, transpò ak depo echantiyon ki mennen nan degradasyon asid nikleyik viral.Sepandan, anpil laboratwa toujou inyore enpòtans ki genyen nan echantiyon.Mwen espere ke atik sa a ka reveye atansyon tout moun nan echantiyon epi fè echantiyon plis syantifik ak rezonab!

Pwodwi ki gen rapò:

Twous Deteksyon Asid Nukleik Variant SARS-CoV-2 (I) (Multiplex PCR Fluorescent Probe Method)-Pou Deteksyon Mutant ki Soti nan Brezil, Lafrik di Sid, ak UK