Metòd PCR ak kontaminasyon ayewosòl asid nikleyik nan laboratwa tès asid nikleyik yo se tankou de kote nan yon pyès monnen.Nou ka sèlman chwazi genyen li oswa ou pa, men nou pa ka chwazi si nou vle li oswa si nou depanse li.
1. Depistaj pou retire ADN
Pou yo rive retire espasyal kontaminasyon ayewosòl asid nikleyik, li nesesè anvan pou elimine retire ADN ki ka retire asid nikleyik nan yon eta likid.Paske pa gen anpil ADN retire ki vrèman travay.Pou metòd eksperimantal la, tanpri al gade nan: retire ADN pa ka yon "kwen sekrè" nan laboratwa a!
Nan eksperyans sa a, 100 kopi / μL (CT apeprè 31) nan plasmid ASFV ak retire ADN ki mezire pa PCR dijital yo te melanje nan volim egal, ak Lè sa a, reyaji nan tanperati chanm pou 10min, 20min ak 30min respektivman.Apre ekstraksyon asid nikleyik, anplifikasyon qPCR te pote soti.Yo te konpare yon kontwòl pozitif melanje ak plasmid ak dlo.Depi eksperyans lan pa te fini an menm tan an, ka gen yon sèten devyasyon ant rezilta yo, men li pa afekte konklizyon eksperyans lan.Jiskaprezan, mwen te evalye 10 pwodwi komèsyal ADN retire.Sèlman pwodwi nimewo 1, nimewo 6 ak nimewo 8 ka efektivman degrade ADN plasmid nan eta likid.Lòt pwodwi yo prèske pa gen okenn efè.
Tablo 1 Efè retire asid nikleik nan retire ADN ki disponib nan komès
2. Eksperyans efè retire ADN nan dezenfektan souvan itilize
1. Depistaj dezenfektan yo itilize souvan
Gen anpil kalite dezenfektan ki souvan itilize nan laboratwa: aldeid, fenol, alkòl, sèl amonyòm kwatènè, peroksid, preparasyon klò, ak asid ak baz.Efè dezenfeksyon dezenfektan sa yo sou mikwo-òganis yo te konplètman verifye pa eksperyans, men Pa gen ase done eksperimantal sou efè degradasyon asid nikleyik.Laboratwa tès asid nikleik bezwen yon dezenfektan ki pa sèlman gen yon bon efè dezenfeksyon sou mikwo-òganis, men tou, ka degrade ADN.Rezilta tès yo montre ke sèlman de preparasyon klò nan 84 dezenfektan ak asid trichloroisocyanuric ak 1 M asid idroklorik satisfè kondisyon yo.Piske 1 M asid idroklorik trè korozif, li rekòmande pou itilize preparasyon klò kòm dechè nan laboratwa tès asid nikleyik.Sepandan, preparasyon klò yo korozif nan metal epi yo pa ka itilize pou dezenfeksyon enstriman ak ekipman yo.
Tablo 2 Efè retire ADN diferan kalite dezenfektan
2. Konsantrasyon minimòm efikas nan preparasyon klò
Klò ki baze sou dezenfektan gen yon efè degradasyon ADN fò, men akòz korozivite metal yo ak iritasyon, yo ka itilize yo netwaye etaj la, kontwa ki pa metal, konsèy tranpe, tib santrifujeur ak lòt atik tès yo.
Dapre "New Coronary Neumonia Epidemic Disinfection Technical Guidelines": Polluants (san pasyan yo, sekresyon ak vomisman) ki disponib klò 5g/L-10g/L dezenfektan ki gen klò;planche, mi yo, ak sifas objè yo sèvi ak klò ki disponib 1g/L dezenfektan klò: rad, kabann ak lòt twal yo premye tranpe nan dezenfektan klò ak 0.5g/L klò ki disponib pou 30 minit, epi apre sa netwaye kòm dabitid.
Tablo 3 Efè retire ADN nan diferan konsantrasyon dezenfektan klò
Rezilta tès yo montre ke: lè konsantrasyon klò efikas la pi gran pase oswa egal a 1.2 g / L, dezenfektan ki gen klò a ka konplètman degrade 100 kopi / μL plasmid lè li itilize pou 5 minit.Lè w ap aji pou 10 minit, 84 dezenfektan ak yon konsantrasyon klò efikas ki pi gran pase oswa egal a 0.6 g/L ka konplètman degrade 100 kopi/μL nan plasmid.
3. Eksperyans pou retire lè polye pa ayewosòl asid nikleyik
Ki jan yo netwaye lè a polye pa ayewosòl asid nikleyik?Pifò nan panse yo se kreye yon anviwònman ki kontamine ayewosòl ak Lè sa a, netwaye li, oswa netwaye asid nikleyik apre kontaminasyon.Pou mwen, yon eksperyans ki pa ka repete ak rezilta yo nan eksperyans la pa ka analize quantitatively pa gen sans, kidonk mwen te prete kèk metòd dezenfeksyon lè dezenfektan.Gade "GB27948-2020 Kondisyon Jeneral pou Dezenfektan Air" ak "Dezenfeksyon Espesifikasyon Teknik"
1. Materyèl tès yo
1.1 Retire ADN: Nan eksperyans sa a, yo te chwazi de retire ADN ki disponib nan komès 6 ak 8 nan Tablo 1.
1.2 Plasmid tès: Lè ou konsidere ke valè CT nan pi polisyon laboratwa a pral pi wo pase 30, konsantrasyon nan plasmid jèn ASFV yo itilize tan sa a se apeprè 100 kopi / μL, ak fliyoresan quantitative PCR CT a se sou 31.07.Ajoute plasmid la nan prelèvman koton flokaj la epi sèk nan lè a.
1.3 Enstriman tès la: Enstriman dezenfeksyon Bilingkehan KVBOX la, ki se dousman sipòte pa Shenzhen Runlian Environmental Technology Co, Ltd., gen ekselan pèfòmans dezenfeksyon lè ak dezenfektan oksijene idwojèn, epi li ka efektivman touye espò ak lòt mikwo-òganis.
1.4 Espas tès: yon fenèt transfè fèmen nan apeprè 0.1 mèt kib.
2. Metòd tès la
Kantite dezenfektan mete sou machin dezenfeksyon an se 10ml, ak konsantrasyon an se 100ml/m3, ki pi wo pase "GB27948-2020 Kondisyon Jeneral pou dezenfektan lè": lè w ap itilize dezenfeksyon espre ayewosòl, kantite dezenfektan yo ta dwe ≤10 ml/m3.
Apre flite, li te sele pou 2 èdtan, ak Lè sa a, prelèvman an flocked ak plasmid la te eliye ak TE, ak prelèvman an flocked ak plasmid la san fumigasyon te mete kòm yon kontwòl.Sèvi ak fluoresans quantitative PCR metòd pou deteksyon.
Tablo 4 Rezilta tès pou retire asid nikleyik lè a
3. Rezilta tès yo
De kalite retire ADN ki ka efektivman degrade plasmid nan eta likid pa gen okenn efè nan tout eksperyans nan lè retire asid nikleyik.Mwen ap chèche pou pi devan pou jwenn yon solisyon ki ka itilize pou retire polisyon ayewosòl asid nikleyik nan lè a pou rezoud konplètman pwoblèm polisyon ayewosòl asid nikleik nan laboratwa tès asid nikleik, men pa gen okenn pwodwi sa yo te jwenn pou tan ke yo te.Mwen kwè ke nan tan kap vini an, pral gen segondè-pèfòmans retire asid nikleyik ki ka itilize pou retire asid nikleyik lè.
4. abandone ilizyon epi konsantre sou prevansyon
Pa gen pwoblèm ki jan konpayi yo fè grandizè sou pwodwi yo retire asid nikleyik, mwen sijere ke majorite nan zanmi ki angaje nan tès asid nikleyik bay moute yon fwa pou tout ilizyon ak rekonèt reyalite a: li trè difisil yo retire lè a polye pa ayewosòl asid nikleyik, oswa pran yon mezi solid prevantif ak travay siveyans chak jou!
Tan pòs: Sep-10-2021
