Ki sa ki se yon vaksen mRNA?
Vaksen an mRNA transfere RNA nan selil yo nan kò a pou eksprime ak pwodui antijèn pwoteyin apre modifikasyon enpòtan an vitro, kidonk mennen kò a pwodui yon repons iminitè kont antijèn an, kidonk elaji kapasite iminitè kò a.[1,3].
Figi 1: Dyagram chematik efè piki dirèk vaksen mRNA [2]
Klasifikasyon vaksen mRNA
Vaksen mRNA yo divize an de kalite:ki pa replikemRNA akoto-anplifyemRNA: mRNA oto-anplifye pa sèlman kode antijèn sib la, men tou, kode replikasyon an ki pèmèt anplifikasyon RNA entraselilè ak mekanis ekspresyon pwoteyin.Vaksen mRNA ki pa replike sèlman kode antijèn sib epi yo genyen 5' ak 3' rejyon ki pa tradui (UTR).Yo bay eksitasyon konplè nan adaptabilite ak iminite natirèl, sètadi ekspresyon antijèn nan situ ak transmisyon siyal danje, epi yo gen aplikasyon sa yo Karakteristik[2,3]
●Can bay eksitasyon konplè nan adaptabilite ak iminite natirèl, sètadi ekspresyon antijèn nan situ ak transmisyon siyal danje.
●Ka pwovoke yon repons iminitè "ekilibre", ki gen ladan efèktè umoral ak selilè ak memwa iminitè
●Can konbine diferan antijèn san yo pa ogmante konpleksite fòmilasyon vaksen an
●Amelyorasyon kontinyèl nan potansyèl iminitè ka reyalize atravè vaksinasyon repete, epi pa gen okenn oswa ti repons iminitè a konpayi asirans lan.
●Vaksen mRNA ki estab chalè ka senplifye transpò ak depo vaksen yo
Figi 2: Dyagram eskematik vaksen mRNA ak mekanis ekspresyon antijèn li yo [4]
Karakteristik vaksen mRNA yo
Konpare ak vaksen tradisyonèl yo, vaksen mRNA yo gen pwosesis pwodiksyon senp, vitès devlopman rapid, pa bezwen kilti selil, ak pri ki ba.Konpare ak vaksen ADN, vaksen mRNA pa bezwen antre nan nwayo a epi pa gen okenn risk pou entegrasyon nan genòm lame a.Mwatye lavi a ka ajiste pa modifikasyon.
Tablo 1: Avantaj ak dezavantaj vaksen mRNA
|
| Avantaj | Enpèfeksyon |
| vaksen mRNA | Rapid rechèch ak devlopman, pwodiksyon vaksen sèlman pran 40 jou | Deklanche yon repons iminitè ki pa nesesè
|
| mRNA enstabilite anba kondisyon fizyolojik, fasil degrade | Pa pral entegre nan genomic a pou fè pou evite posib mitasyon ki ka geri ou
| |
| Pa bezwen okenn siyal lokalizasyon nikleyè, transcription | Efikasite nikleyè sekirite a rete pou verifye
|
Figi 3: Organigram pwodiksyon ak preparasyon vaksen mRNA [4]
Twous Izolasyon RNA Viral Foregene
RT-qPCR fasil (yon sèl etap)
Estrateji amelyore pou preparasyon vaksen mRNA
Akòz estabilite pòv nan mRNA tèt li, degradasyon fasil pa nucleases nan tisi, efikasite antre selil ki ba, ak efikasite tradiksyon ki ba, domaj sa yo limite aplikasyon an nan vaksen mRNA.Efikasite tradiksyon tou jwe yon wòl trè kritik.Machin livrezon yo ka divize an vektè viral ak vektè ki pa viral (ki gen ladan lipozom, ki pa lipozom, viris, nanopartikul, elatriye).Se poutèt sa, mezi amelyorasyon ki enpòtan yo nesesè.Sa ki anba la a se yon estrateji amelyorasyon famasi pou preparasyon mRNA[2]
1 Sentèz analogue bouchon oswa itilize anzim capping pou estabilize mRNA epi ogmante tradiksyon pwoteyin lè yo lye ak faktè inisyasyon tradiksyon ekaryotik 4E (EIF4E)
2 Ajiste eleman yo nan rejyon 5′-untranslated (UTR) ak 3′-UTR pou estabilize mRNA epi ogmante tradiksyon pwoteyin.
3 Ajoute ke Poly(A) ka estabilize mRNA epi ogmante tradiksyon pwoteyin
4 Nukleozid modifye pou diminye deklanchman iminitè natirèl ak ogmante tradiksyon
5 Tretman ak RNase III ak pirifikasyon rapid pwoteyin likid chromatografi (FPLC) ka diminye deklanchman iminitè ak ogmante tradiksyon.
6 Optimize sekans oswa kodon pou ogmante tradiksyon
7 Ko-livrezon faktè inisyasyon tradiksyon ak lòt metòd pou chanje tradiksyon ak iminojenisite
Figi 4: Pwodiksyon mRNA in vitro transcription (IVT) ak pwosesis asanble [5]
Gwo echèl preparasyon ADN plasmid
Pirifikasyon ADN Plasmid sitou retire kontaminan tankou RNA, endotoksin ADN louvri-sèk, pwoteyin lame ak asid nikleyik lame, epi anjeneral transfòme plasmid recombinant nan E. coli.E. coli sibi fèmantasyon gwo dansite, Lè sa a, separasyon solid-likid, ak koleksyon E. coli.Lè sa a, E. coli a sibi liz alkalin, separasyon solid-likid santrifujeur ak klarifikasyon mikrofiltrasyon apre liz, ultrafiltrasyon ak konsantrasyon apre klarifikasyon, ak Lè sa a, pirifikasyon kwomatografik.
Pirifikasyon ADN plasmid:
Foregene Jeneral Plasmid Mini Twous
【1】苗鹤凡, 郭勇, 江新香.mRNA疫苗研究进展及挑战[J].免疫学杂志, 2016(05):446-449.
【2】Pardi N , Hogan MJ , Porter FW , et al.Vaksen mRNA - yon nouvo epòk nan vaksenoloji [J].Nature Reviews Drug Discovery, 2018.
【3】Kramps T., Elbers K. (2017) Entwodiksyon nan vaksen RNA.Nan: Kramps T., Elbers K. (eds) RNA Vaccines.Methods in Molecular Biology, vol 1499. Humana Press, New York, NY.
【4】Maruggi G, Zhang C, Li J, et al.mRNA kòm yon Teknoloji Transfòmasyon pou Devlopman Vaksen Kontwòl Maladi Enfektye [J].Terapi molekilè, 2019.
【5】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, ,Tailoring mRNA Vaccine to Balance Innate/Adaptive Immune Response,Trends in Molecular Medicine,Volum 26, Issue 3,2020,Paj 311-323.
Lè poste: 05-aout 2021
