Antikò, yo rele tou imunoglobulin (Ig), se glikoprotein ki espesyalman mare nan antijèn.
 
Preparasyon antikò konvansyonèl yo pwodui lè iminize bèt yo ak kolekte antiserom.Se poutèt sa, antiserom anjeneral gen antikò kont lòt antijèn ki pa gen rapò ak lòt eleman pwoteyin nan serik la.Molekil antijèn jeneral yo sitou gen plizyè epitop diferan, kidonk antikò konvansyonèl yo tou se yon melanj de antikò kont plizyè epitop diferan.Menm antikò serik konvansyonèl ki dirije kont menm epitop yo toujou konpoze de antikò eterojèn ki pwodui pa diferan klon selil B yo.Se poutèt sa, antikò serik konvansyonèl yo rele tou antikò poliklonal, oswa antikò poliklonal pou kout.
 
Antikò monoklonal (antikò monoklonal) se yon antikò trè inifòm ki te pwodwi pa yon sèl script selil B epi sèlman dirije kont yon epitop espesifik.Anjeneral li prepare pa teknoloji ibridòm—teknoloji antikò ibridòm baze sou teknoloji fizyon selil, konbine selil B ak kapasite pou sekrete antikò espesifik ak selil myelom ak kapasite kwasans enfini nan ibrid selil B.Selil hybridoma sa a gen karakteristik yon selil paran.Li ka pwopagasyon endefiniman ak imòtèl nan vitro tankou selil myelom, epi li ka sentèz ak sekrete antikò espesifik tankou lenfosit las.Atravè klonaj, yo ka jwenn yon liy monoklonal ki sòti nan yon sèl selil ibridòm, se sa ki, yon liy selil ibridòm.Antikò li pwodui yo se antikò trè omojèn kont menm detèminan antijenik la, se sa ki, antikò monoklonal.
 
Antikò egziste kòm youn oswa plis monomè ki gen fòm Y (sa vle di, antikò monoklonal oswa antikò poliklonal).Chak monomè ki gen fòm Y konpoze de 4 chenn polipèptid, ki gen ladan de chenn lou ki idantik ak de chenn limyè ki idantik.Chèn limyè ak chèn lou yo rele dapre pwa molekilè yo.Tèt estrikti ki gen fòm Y a se rejyon an varyab, ki se sit la obligatwa antijèn.(Ekstrè nan Detai Bio-monoclonal Antibody Concept)
 
Estrikti antikò
Chèn lou
Gen senk kalite chèn lou Ig mamifè, yo rele ak lèt ​​grèk α, δ, ε, γ, ak μ.Antikò korespondan yo rele IgA, IgD, IgE, IgG, ak IgM.Diferan chenn lou diferan nan gwosè ak konpozisyon.α ak γ gen apeprè 450 asid amine, pandan y ap μ ak ε gen apeprè 550 asid amine.
Chak chèn lou gen de rejyon: rejyon konstan ak rejyon varyab.Tout antikò nan menm kalite a gen menm rejyon an konstan, men gen diferans ki genyen ant antikò nan diferan kalite.Rejyon konstan nan chenn lou γ, α, ak δ yo konpoze de twa domèn Ig an tandem, ak yon rejyon gon pou ogmante fleksibilite li yo;rejyon konstan chenn lou μ ak ε yo konpoze de 4 domèn Ig.Rejyon varyab nan chèn lou antikò ki pwodui pa diferan selil B diferan, men rejyon varyab nan antikò ki pwodui pa menm selil B oswa klonaj selil la se menm bagay la, ak rejyon varyab chak chèn lou se apeprè 110 asid amine nan longè., Epi fòme yon sèl domèn Ig.
 
Chèn limyè
Gen sèlman de kalite chenn limyè nan mamifè: kalite lambda ak kalite kappa.Chak chèn limyè gen de domèn lye: yon rejyon konstan ak yon rejyon varyab.Longè chèn limyè a se apeprè 211 ~ 217 asid amine.De chenn limyè ki genyen nan chak antikò yo toujou menm.Pou mamifè, chèn limyè nan chak antikò gen yon sèl kalite: kappa oswa lambda.Nan kèk vertebre ki pi ba yo, tankou pwason cartilaginous (pwason Cartilage) ak pwason zo, yo jwenn lòt kalite chenn limyè tankou kalite iota (iota).
 
Segman Fab ak Fc
Segman Fc a ka dirèkteman konbine avèk anzim oswa koloran fliyoresan pou mete etikèt sou antikò.Li se pati kote antikò a rive sou plak la pandan pwosesis ELISA, epi li se tou pati kote dezyèm antikò a rekonèt ak mare nan imunoprecipitation, imunoblotting ak imunohistochimi.Antikò yo ka idrolize nan de segman F (ab) ak yon segman Fc pa anzim pwoteolitik tankou papain, oswa yo ka kase nan rejyon an charnyèr pa pepsin ak idrolize nan yon segman F (ab) 2 ak yon segman Fc.Fragman antikò IgG yo pafwa trè itil.Akòz mank de segman Fc, segman F(ab) pa pral presipite ak antijèn an, ni selil iminitè yo pa pral kaptire nan etid in vivo.Akòz ti fragman molekilè yo ak mank de fonksyon kwazman (akòz mank de segman Fc), segman Fab anjeneral yo itilize pou radyolabeling nan syans fonksyonèl, ak segman Fc se sitou itilize kòm yon ajan bloke nan tach istochimik.
 
Rejyon varyab ak konstan
Rejyon varyab (rejyon V) sitiye nan 1/5 oswa 1/4 (ki gen apeprè 118 résidus asid amine) nan chèn H tou pre N-tèminal la ak 1/2 (ki gen apeprè 108-111 résidus asid amine) tou pre N-tèminal chèn L la.Chak rejyon V gen yon bag peptide ki fòme pa lyezon disulfid andedan chèn, epi chak bag peptide gen apeprè 67 a 75 résidus asid amine.Konpozisyon ak aranjman nan asid amine nan rejyon V la detèmine espesifik antijèn obligatwa nan antikò a.Akòz kalite ki toujou ap chanje ak sekans asid amine nan rejyon V, yo ka fòme anpil kalite antikò ki gen diferan espesifikasyon antijèn obligatwa.Rejyon V nan chèn L ak chèn H yo rele VL ak VH, respektivman.Nan VL ak VH, konpozisyon asid amine ak sekans kèk rejyon lokal yo gen yon pi wo degre de varyasyon.Rejyon sa yo rele hypervariable regions (HVR).Konpozisyon asid amine ak aranjman pati ki pa HVR yo nan rejyon V yo relativman konsèvatif, ki rele rejyon fondasyon an.Gen twa rejyon hypervariable nan VL, anjeneral ki sitiye nan résidus asid amine 24 a 34 ak 89 a 97 respektivman.Twa HVR yo nan VL ak VH yo rele HVR1, HVR2 ak HVR3, respektivman.Rechèch ak analiz X-ray kristal diffraction pwouve ke rejyon hypervariable a se tout bon plas kote antijèn antikò a mare, kidonk li rele rejyon konplemantè-detèmine (CDR).HVR1, HVR2 ak HVR3 nan VL ak VH ka rele CDR1, CDR2 ak CDR3 respektivman.Anjeneral, CDR3 gen yon pi wo degre de hypervariability.Rejyon hypervariable a se tou kote prensipal kote detèminan idiotypic molekil Ig egziste.Nan pifò ka yo, chèn H jwe yon wòl pi enpòtan nan lyezon antijèn an.
Rejyon konstan (rejyon C)sitiye nan 3/4 oswa 4/5 (apeprè soti nan asid amine 119 nan tèminal C a) nan chèn H a tou pre tèminal C a ak 1/2 (gen ladann apeprè 105 résidus asid amine) tou pre tèminal C nan chèn L la.Chak rejyon fonksyonèl nan chèn H a gen apeprè 110 résidus asid amine, epi li gen yon bag peptide ki konpoze de 50-60 résidus asid amine ki konekte pa lyezon disulfid.Konpozisyon asid amine ak aranjman rejyon sa a relativman konstan nan menm chèn Ig izotip L bèt ak chèn H menm kalite.Menm bagay la tou, li ka sèlman espesyalman mare nan antijèn ki koresponn lan, men estrikti nan rejyon C li yo se menm bagay la, se sa ki, li gen menm antijenisite la.Chwal anti-moun IgG segondè antikò (oswa anti-antikò) ka konbine avèk de yon konbinezon de antikò (IgG) kont exotoxins diferan rive.Sa a se yon baz enpòtan pou prepare antikò segondè ak aplike fluorescein, izotòp, anzim ak lòt antikò ki make.
 
 
Pwodwi ki gen rapò:
Twous Cell Direct RT-qPCR