Animal Total RNA Izolasyon Twous Total RNA Ekstraksyon ak Pirifikasyon Twous pou Tisi Animal & Selil
Deskripsyon Kit:
Byen vit ak efikasite ekstrè-wo pite ak-wo kalite total RNA soti nan tisi bèt divès kalite.
Pa bezwen enkyete sou degradasyon RNA.Tout sistèm lan se RNase-gratis
Efektivman retire ADN lè l sèvi avèk DNA-Netwayaj Kolòn
Retire ADN san yo pa ajoute DNase
Senp-tout operasyon yo fini nan tanperati chanm
Vit-operasyon ka fini nan 30 minit
Safe-pa gen okenn reyaktif òganik itilize
Segondè pite-OD260/280≈1.8-2.1
Kits Deskripsyon
50 preparasyon, 200 preparasyon
Twous sa a itilizevire kolòn ak fòmildevlope pa konpayi nou an, ki ka ekstrè-wo pite ak-wo kalite total RNA soti nan tisi bèt divès kalite ak efikasite segondè.Li bay yon kolòn ADN-Netwayaj efikas, ki ka fasilman separe ak adsorbe ADN jenomik soti nan supernatant la ak tisi lysate, senp ak tan-ekonomize;Kolòn RNA-sèlman ka byen mare RNA epi yo ka trete ansanm ak yon fòmil inik Anpil echantiyon.
Tout sistèm nan se RNase-Free, pou ke RNA a ekstrè pa degrade;Tanpon RW1, Tanpon RW2 sistèm lave tanpon, pou ke RNA a jwenn yo gratis nan pwoteyin, ADN, iyon, ak polisyon konpoze òganik.
Konpozan twous
| Animal Total RNA izole Twous | ||
| Konpozan twous | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 T | 200 T | |
| Tanpon RL1* | 25ml | 100ml |
| Tanpon RL2 | 15ml | 60ml |
| Tanpon RW1* | 25ml | 100ml |
| Tanpon RW2 | 24ml | 96ml |
| RNase-gratis ddH2O | 10ml | 40ml |
| Kolòn RNA-sèlman | 50 | 200 |
| ADN-Netwayaj Kolòn | 50 | 200 |
| Manyèl Enstriksyon | 1 moso | 1 moso |
Enfòmasyon sou pwodwi
| Fòma | Vire kolòn | Eleman pou pirifye | Foregene kolòn, reyaktif |
| Flux | 1-24 echantiyon | Tan pou chak preparasyon | ~ 30 min (24 echantiyon) |
| Santrifij | Santrifij biwo | Separasyon piroliz | Separasyon santrifujeur |
| Egzanp | Tisi bèt;selil | Kantite echantiyon yo genyen | Tisi: 10-20 mg;Selil:(1-5)×106 |
| Volim elisyon | 50-200 μL | Maksimòm volim chaje | 850 μL |
Karakteristik & avantaj
■ Pa bezwen enkyete w sou degradasyon RNA;tout sistèm lan se RNase-gratis
■ Efektivman retire kolòn netwayaj ADN ki sèvi ak ADN
■ Retire ADN san yo pa ajoute DNaz
■ Senp-tout operasyon yo fini nan tanperati chanm
■ Vit-operasyon ka konplete nan 30 minit
■ Safe-pa gen okenn reyaktif òganik obligatwa
■ Segondè pite -OD260/280≈1.8-2.1
Aplikasyon pou twous
Li apwopriye pou fè ekstraksyon ak pirifikasyon RNA total ki soti nan yon varyete tisi bèt fre oswa nan frizè oswa selil kiltive.
Paramèt pwodwi
■ Aplikasyon en: premye-seksyon cDNA sentèz, RT-PCR, klonaj molekilè, Northern Blot, elatriye.
■ Echantiyon: tisi bèt, selil kiltive
■ Dòz: Tisi 10-20mg, Cells(2-5)×106
■ Kapasite maksimòm ADN obligatwa kolòn pou pirifye: 80 μg
■ Volim elisyon: 50-200 μl
Dyagram
Animal Total RNA Izolasyon Twous trete 20mg
Echantiyon fre sourit, pran 5% pirifye total RNA 1% agar
Elektwoforèz glikojèl
1: Larat 2: Ren
3: Fwa 4: Kè
Depo ak etajè lavi
Twous la ka estoke pou 24 mwa nan tanperati chanm (15-25 ℃) oswa 2-8 ℃ pou yon tan ki pi long.Tanpon RL1 ka estoke nan 4 ℃ pou 1 mwa apre yo fin ajoute β-mercaptoethanol (si ou vle).
Atik site yo
1.SI:18.808:Zheng, Q., Qin, F., Luo, R., et al.mRNA-Chaje Lipid-tankou nanopartikul pou koreksyon baz fwa atravè Optimizasyon nan konsepsyon santral konpoze.Adv.Fonksyon.Mater.2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.SI:18.187:Li X, Hong W, Yang J, et al.Apoptoz espontane nan selil nan preparasyon selil souch ki ka geri ou fè efè imunomodulateur atravè liberasyon fosfatidilserin.Siyal Transduct Sib Ther.2021 Jiyè 14;6(1):270.doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.SI: 17.97:Dai Z, Liu H, Liao J, et al.N7-Methylguanosine tRNA modifikasyon amelyore tradiksyon mRNA onkogenik ak ankouraje pwogresyon cholangiocarcinoma intrahepatic.Mol selil.29 jiyè 2021:S1097-2765(21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.SI:9.225:Cao X, Shu Y, Chen Y, et al.Mettl14-Medyate m6A Modifikasyon Fasilite Rejenerasyon Fwa pa kenbe omeyostazi Retikul Endoplasmik.Selil Mol Gastroenterol Hepatol.2021;12(2):633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
RNA isoaltion kits pou lòt sous echantiyonyo disponib:
Selil, plant, viral, san, elatriye.
RNA pa ekstrè oswa pwodiksyon RNA yo ba
Gen souvan yon varyete de faktè ki afekte efikasite rekiperasyon, tankou: echantiyon tisi kontni RNA, metòd operasyon, volim elisyon, elatriye.
1. Yo te fè beny glas oswa santrifijasyon kriyojenik (4 °C) pandan operasyon an.
Rekòmandasyon: Opere nan tanperati chanm (15-25 ° C) pandan tout pwosesis la, pa benyen glas ak santrifuje nan tanperati ki ba.
2. Konsèvasyon echantiyon move oswa twòp tan depo echantiyon.
Rekòmandasyon: Sere echantiyon yo nan -80 °C oswa friz nan nitwojèn likid epi evite repete itilize friz-dekonjle;eseye sèvi ak tisi fre oswa selil kiltive pou fè ekstraksyon RNA.
3. Liz echantiyon ensifizan.
Rekòmandasyon: Lè omojènize tisi a, asire ke tisi a ase omojeneize epi selil tisi yo ase fann pou eksplike liberasyon RNA.
4. Eluyan an pa ajoute kòrèkteman.
Rekòmandasyon: Konfime ke RNase-Free ddH2O ajoute goute nan mitan manbràn kolòn pirifikasyon an.
5. Volim ki kòrèk la nan etanòl absoli pa te ajoute nan Tanpon RL2 oswa Tanpon RW2.
Rekòmandasyon: Swiv enstriksyon yo, ajoute volim ki kòrèk la nan etanòl absoli nan Tanpon RL2 ak Tanpon RW2 epi melanje byen anvan w itilize twous la.
6. Dòz echantiyon tisi pa apwopriye.
Rekòmandasyon: Sèvi ak 10-20 mg tisi oswa (1-5) × 106selil pou chak 500 μl tanpon RL1, paske twòp tisi yo ka lakòz ekstraksyon RNA redwi.
7. Move volim elisyon oswa elisyon enkonplè.
Rekòmandasyon: volim elisyon kolòn pou pirifye a se 50-200 μl;si efè elisyon an pa satisfezan, li rekòmande pou pwolonje tan plasman tanperati chanm lan apre li fin ajoute ddH prechofe RNase-Free.2O, egzanp pou 5-10 min.
8.Kolòn pou pirifye a gen rezidi etanòl apre Buffer RW2 lave.
Rekòmandasyon: Si gen rezidi etanòl apre lave tanpon RW2, santrifujasyon tib vid pou 1min, tan pou operasyon santrifujasyon tib vid la ka ogmante a 2min, oswa kolòn pou pirifye a ka mete nan tanperati chanm pou 5 min pou retire etanòl rezidyèl la byen.
RNA pirifye degrade
Bon jan kalite RNA pirifye a gen rapò ak faktè tankou prezèvasyon echantiyon an, kontaminasyon RNase, ak manipilasyon, elatriye.
1. Echantiyon tisi yo pa kenbe nan tan.
Rekòmandasyon: Si echantiyon tisi oswa selil yo pa itilize nan yon fason apwopriye apre koleksyon, imedyatman kriyoprezève nan -80 °C oswa nitwojèn likid.Pou ekstrè RNA, sèvi ak yon tisi ki fèk pran oswa echantiyon selil chak fwa sa posib.
2. Repete friz-dekonjle echantiyon tisi yo.
Rekòmandasyon: Lè w estoke echantiyon tisi yo, li pi bon pou koupe yo an ti moso pou prezèvasyon, epi retire youn nan moso yo lè w ap itilize yo pou evite repete friz-dekonjle echantiyon an ak degradasyon RNA.
3. RNase prezante oswa pa mete gan jetab, mask, elatriye pandan operasyon an.
Rekòmandasyon: Eksperyans ekstraksyon RNA yo pi byen fèt nan chanm manipilasyon RNA separe epi yo netwaye tab la anvan eksperyans lan.
Mete gan jetab ak mask pandan eksperyans la pou minimize degradasyon RNA ki te koze pa entwodiksyon RNase.
4. Reyaktif yo kontamine ak RNase pandan w ap itilize yo.
Rekòmandasyon: Ranplase ak yon nouvo Twous Izolasyon Animal Total RNA pou eksperyans ki gen rapò.
5. Tib santrifij, konsèy, elatriye yo itilize nan manipilasyon RNA yo kontamine ak RNase.
Rekòmandasyon: Konfime ke tib santrifij, konsèy, pipèt, elatriye yo itilize nan ekstraksyon RNA yo tout RNase-gratis.
Pirifye jwenn RNA afekte eksperyans en
RNA pirifye pa kolòn pou pirifye a, si iyon yo sèl, kontni pwoteyin twò gwo pral afekte eksperyans nan en, tankou: transcription ranvèse,Northern Blot et al.
1. RNA ki eliye a gen résidus ion sèl.
Rekòmandasyon: Konfime ke volim kòrèk etanòl yo te ajoute nan tanpon RW2 epi fè 2 lave kolòn pou pirifye nan vitès santrifujeur ki endike pou operasyon an;si gen nenpòt rezidi iyon sèl, kite kolòn pou pirifye nan Tanpon RW2 pou 5 min nan tanperati chanm epi fè santrifijasyon pou maksimize retire kontaminasyon sèl la.
2. Etanòl rezidi nan RNA elutioned.
Rekòmandasyon: Konfime ke apre tanpon RW2 lave, fè operasyon santrifujasyon tib vid la nan vitès santrifujasyon ki endike pou operasyon an, ogmante tan an nan operasyon santrifujasyon tib vid la a 2 min si gen toujou rezidi etanòl, oswa kite li nan tanperati chanm pou 5 min apre santrifujasyon tib vid la pou maksimize retire rezidi ethanòl la.
