Plant Total RNA Isolation Kit Plus Total RNA Purificaiton Twous pou Plant ki rich nan polisakarid ak polifenol
Deskripsyon Kit:
Cat.No.RE-05021/05022/05024
Pou pirifye RNA total ki soti nan echantiyon plant jeneral ki gen gwo konpozan polisakarid ak polifenol.
Byen vit ekstrè-wo kalite total RNA soti nan echantiyon plant ak kontni segondè nan polisakarid ak polifenol.
RNase-Free Sèvi ak ADN-Netwayaj Kolòn
Senp-tout operasyon yo fini nan tanperati chanm
Vit-operasyon ka fini nan 30 minit
Safe-pa gen okenn reyaktif òganik itilize 
Espesifikasyon
50 preparasyon, 200 preparasyon
Twous la sèvi ak kolòn nan vire ak fòmil devlope pa Foregene, ki ka efikasman ekstrè-wo pite ak-wo kalite total RNA soti nan tisi plant divès kalite ak polisakarid segondè oswa kontni polifenol.Li bay kolòn ADN-Netwayaj la ki ka fasilman retire ADN jenomik nan supernatant la ak tisi lisat.Kolòn RNA-sèlman ka efektivman mare RNA.Twous la ka trete yon gwo kantite echantiyon an menm tan.
Tout sistèm nan pa gen RNase, kidonk RNA pirifye a pa pral degrade.Tanpon PRW1 ak Tanpon PRW2 ka asire ke RNA yo jwenn pa kontamine pa pwoteyin, ADN, iyon, ak konpoze òganik.
Konpozan twous
| Tanpon PSL1, Tanpon PS, Tanpon PSL2 |
| Tanpon PRW1, Tanpon PRW2 |
| RNase-gratis ddH2O, ADN-Netwayaj Kolòn |
| Kolòn RNA-Sèlman |
Karakteristik & avantaj
■ Operasyon nan tanperati chanm (15-25 ℃) pandan tout pwosesis la, san benyen glas ak santrifujasyon tanperati ki ba.
■ Ranpli twous RNase-Free, pa bezwen enkyete sou degradasyon RNA.
■ Patikilyèman apwopriye pou pirifye RNA soti nan echantiyon plant nan polisakarid ak polifenol.
■ Kolòn netwayaj ADN li espesyalman ADN, pou twous la ka retire kontaminasyon ADN jenomik san yo pa ajoute DNaz.
■ Sede RNA segondè: Kolòn RNA sèlman ak fòmil inik ka pirifye RNA avèk efikasite.
■ Vitès vit: fasil pou opere epi yo ka ranpli nan 30 minit.
■ Sekirite: pa gen okenn reyaktif òganik obligatwa.
■ Segondè bon jan kalite: Fragman RNA pirifye yo gen pite segondè, san pwoteyin ak lòt enpurte, epi yo ka satisfè divès aplikasyon eksperimantal en.
Paramèt pwodwi
■ Aplikasyon en: premye-seksyon cDNA sentèz, RT-PCR, klonaj molekilè, Northern Blot, elatriye.
■ Egzanp: Tisi plant polisakarid ak polifenol fre oswa jele
■ Dòz: 50mg tisi plant
■ Kapasite maksimòm RNA obligatwa kolòn pou pirifye: 80 μg
■ Volim elisyon: 50-200 μl
Aplikasyon pou twous
Li apwopriye pou fè ekstraksyon ak pirifikasyon RNA total ki soti nan echantiyon tisi plant fre oswa nan frizè (espesyalman tisi fèy plant fre) ak kontni segondè polisakarid ak polifenol.
Flux travay
Dyagram
Plant Total RNA Isolation Kit Plus trete 50mg fèy fre nan polisakarid ak polifenol, ak 5% RNA pirifye te teste pa elektwoforèz.
1: Bannann
2: jenkgo
3: Koton
4: grenad
Depo ak etajè lavi
Twous sa a ka estoke pou 24 mwa nan kondisyon sèk nan tanperati chanm (15-25 ℃);si li bezwen estoke pou yon tan ki pi long, li ka estoke nan 2-8 ℃.
Tanpon PSL1 ka mete nan 4 ℃ pou 1 mwa apre yo fin ajoute β-mercaptoethanol (li rekòmande pou ajoute li an menm tan an nan eksperyans).
Kolòn nan ploge
Apre kolòn nan ploge, pwodiksyon an RNA redwi oswa menm enposib pou pirifye RNA a, ak mas RNA yo jwenn ba.
Analiz kòz komen:
1. Egzanp repo yo pa bon jan.
Kase echantiyon an pa lakòz konplètman bloke ADN-NETWAYAJ KOLÒN, pandan y ap afekte pwodiksyon ak kalite RNA.Nou rekòmande operasyon rapid fanm k'ap pile nan yon nitwojèn likid ase lè ou kase echantiyon yo, Eseye kraze miray selil echantiyon an, manbràn selilè ak lòt tisi.Pou echantiyon plant nan polisakarid polyol, nou rekòmande pou w itilize Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.
2. Lè aspirasyon sipènatant echantiyon separe a ak kolòn netwayaj ADN, yo ka respire selil posib pou presipite ki fragmantasyon an.
Sediman fragman selil yo pran yo pral lakòz Kolòn RNA SÈLMAN an ki pral bloke lè operasyon adsorption RNA an fèt (gade etap 6 la).Nou rekòmande ou ak anpil atansyon lè aspirasyon supernatant sa a pou evite debri selil yo te aspire.
3. Egzanp premye kantite lajan an twòp.
Twòp itilizasyon echantiyon pral lakòz echantiyon enkonplè fwagmantasyon oswa liz selil enkonplè pa Buffer PSL1, sa ki lakòz bloke kolòn pou pirifye a pandan pirifikasyon.Twous Izolasyon RNA Total Plant Chak echantiyon fonksyònman pirifye se 50 mg.Pou echantiyon plant nan polisakarid polyol, nou rekòmande pou w eseye Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.
4. Tanperati santrifijeur a twò ba.
Tout pwosesis izolasyon RNA ak pirifikasyon an fèt nan tanperati chanm (20-25°C), eksepte ke tisi echantiyon an kase pa nitwojèn likid. Tanperati kèk santrifujeur kriyojenik se pi ba pase 20.℃, ki ka lakòz bloke ADN-Netwayaj Kolòn ak/oswa RNA-Sèlman Kolòn.Si sa rive, mete tanperati santrifij la sou 20-25℃, akasire w ke melanj liz la ak/oswa sipènatant etanòl ki te ajoute a te prechofe a 37°C.
Pa gen RNA ekstrè oswa sede RNA ba
Anjeneral gen anpil faktè ki afekte efikasite rekiperasyon an, tankou: echantiyon kontni RNA, metòd operasyon, volim elisyon, elatriye.
Analiz de kòz komen jan pi ba a:
1.Yon beny glas oswa tanperati ki ba (4 ° C) santrifujasyon te fèt pandan operasyon an.
Sijesyon: Opere nan tanperati chanm (15-25°C) nan pwosesis la tout antye, pa fè beny glas ak santrifujasyon tanperati ki ba.
2. RNA a te degrade akòz move prezèvasyon echantiyon an oswa prezèvasyon alontèm echantiyon an.
Rekòmandasyon: echantiyon ki fèk kolekte yo ta dwe byen vit nan frizè nan nitwojèn likid, ak Lè sa a, estoke nan -80 ° C pou yon tan long, evite repete konjelasyon ak dekonjle echantiyon;oswa imedyatman tranpe echantiyon yo nan RNA stabilizer solisyon RNAlater (echantiyon bèt).
3.Ensifizan fwagmantasyon echantiyon ak lysis mennen nan blokaj nan kolòn nan pirifikasyon.
Sijesyon: Lè fanm k'ap pile tisi a, tanpri asire ke tisi a ase tè, epi byen vit transfere li nan tanpon PSL1 la pre-prepare (konfime ke yo te ajoute pwopòsyon ki kòrèk la nan β-ME, gade etap 1 nan pwosedi a).
4.Eluyan an te ajoute mal.
Sijesyon: Asire w ke RNase-Free ddH2O koule nan mitan manbràn kolòn pou pirifye a.
5. Volim ki kòrèk la nan etanòl absoli pa te ajoute nan tanpon PSL2 oswa tanpon PRW2.
Sijesyon: Tanpri swiv enstriksyon yo, ajoute volim ki kòrèk la nan etanòl absoli nan Tanpon PSL2 ak Tanpon PRW2 epi melanje byen anvan yo itilize twous la.
6. Kantite echantiyon tisi a pa apwopriye.
Sijesyon: Sèvi ak 50 mg tisi pou chak 500 μl Tanpon PSL1.Sèvi ak twòp tisi ap diminye kantite RNA ekstrè epi pite RNA ki kapab lakòz yo ap redwi tou.Nou rekòmande pou premye dòz echantiyon an pa ta dwe depase 50 mg pou chak operasyon ekstraksyon RNA.
7. Volim elisyon ki pa apwopriye oswa elisyon enkonplè.
Sijesyon: volim eluyan kolòn pou pirifye a se 50-200 μl;si efè elisyon an pa satisfezan, li rekòmande pou pwolonje tan an nan tanperati chanm apre yo fin ajoute prechofe RNase-Free ddH2O, tankou 5-10min.
8.Kolòn pou pirifye a gen rezidi etanòl apre lave ak BufferPRW2.
Sijesyon: Si tib vid la santrifuje pou 1 min epi gen etanòl toujou rete apre yo fin lave nan Tanpon PRW2, ou ka ogmante tan an nan santrifijasyon tib vid la a 2 min, oswa mete kolòn nan pirifye nan tanperati chanm pou 5 min konplètman retire etanòl la rezidyèl.
9.Tous la te itilize mal.
Sijesyon: Pou echantiyon plant nan polisakarid polifenolik, lè l sèvi avèk twous komen tankou Plant Total RNA Isolation Kit ka pa kapab jwenn echantiyon RNA ideyal.Nou rekòmande ou sèvi ak Plant Total RNA IsolationKit Plus, ki fèt espesyalman pou echantiyon plant polisakarid polifenolik.Yon twous ki devlope espesyalman pou ekstrè RNA nan echantiyon plant polifenol ak polisakarid.
Valè OD260/OD280 ba
Elisyon RNA ak ddH2O epi yo itilize pou lekti espektwofotomèt la bay valè OD260/OD280 ki ba.Nou rekòmande pou w sèvi ak 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 (olye ke ddH2O san RNase pou elite RNA) pou jwenn valè OD260/OD280 relativman kòrèk, gade “Tès konsantrasyon ak pirifikasyon RNA” nan paj 19.
RNA pirifye a degrade
Kalite RNA pirifye a gen rapò ak faktè tankou prezèvasyon echantiyon, kontaminasyon RNase, ak manipilasyon.
Analiz de kòz komen:
1.Echantiyon tisi yo pa te estoke nan tan apre koleksyon.
Rekòmandasyon: Si echantiyon tisi yo pa itilize nan tan apre yo fin kolekte, tanpri estoke yo nan nitwojèn likid nan tanperati ki ba imedyatman oswa transfere yo nan -80 ° C pou depo alontèm apre konjelasyon rapid nan nitwojèn likid, oswa imedyatman plonje echantiyon yo nan solisyon RNA estabilizasyon RNAlater (echantiyon bèt).Pou fè ekstraksyon RNA, eseye sèvi ak echantiyon tisi ki fèk kolekte.
2.Repete konjelasyon ak dekonjle echantiyon tisi yo.
Sijesyon: Lè w estoke echantiyon tisi, li pi bon pou koupe yo an ti moso pou prezèvasyon, epi retire yon pati nan yo lè w ap itilize yo pou evite degradasyon RNA ki te koze pa konjelasyon repete ak dekonjle echantiyon yo.
3.RNase prezante nan sal operasyon an oswa pa mete gan jetab, mask, elatriye.
Sijesyon: Eksperyans ekstraksyon RNA yo pi byen fèt nan operasyon RNA separe, epi yo ta dwe netwaye tab laboratwa a anvan eksperyans lan, epi yo ta dwe mete gan ak mask jetab pandan eksperyans la pou evite degradasyon RNA ki te koze pa entwodiksyon RNase nan pi gwo limit.
4.Reyaktif la kontamine pa RNase pandan w ap itilize.
Sijesyon: Ranplase ak yon nouvo seri twous ekstraksyon RNA total plant pou eksperyans ki gen rapò.
5. Tib santrifujeur yo ak pwent pipèt yo itilize pou manipilasyon RNA yo kontamine ak RNase.
Sijesyon: Asire w ke tib santrifij, pwent pipèt, pipèt, elatriye yo itilize nan ekstraksyon RNA yo tout san RNase.
Manyèl Enstriksyon:
Plant Total RNA Isolation Kit Plus Manyèl Enstriksyon
