Prelèvman Buccal/Kat FTA Twous Izolasyon ADN Genomic ADN Ekstraksyon oswa Twous Pirifikasyon soti nan Prelèvman Buccal
Deskripsyon Kit:
Byen vit pirifye bon jan kalite ADN jenomik soti nan echantiyon bukal/FTA Kat.
◮Pa gen kontaminasyon RNase:Kolòn ADN sèlman ki bay twous la fè li posib pou retire RNA nan ADN jenomik la san yo pa ajoute RNase pandan eksperyans la, sa ki anpeche laboratwa a kontamine ak RNase ekzojèn.
◮Vitès vit:Foregene Protease gen pi wo aktivite pase pwoteaz menm jan an, epi dijere echantiyon tisi byen vit;operasyon an se senp, epi operasyon an ekstraksyon ADN jenomik ka fini nan 20-80 minit.
◮Pratik:Santrifijasyon an fèt nan tanperati chanm, epi pa gen okenn nesesite pou santrifujasyon ba-tanperati 4 ° C oswa presipitasyon etanòl nan ADN.
◮Sekirite:Pa gen okenn ekstraksyon reyaktif òganik obligatwa.
◮Bon kalite:ADN jenomik ekstrè a gen fragman gwo, pa gen okenn RNA, pa gen okenn RNase, ak kontni ion ki ba anpil, ki ka satisfè kondisyon ki nan eksperyans divès kalite.
◮Sistèm mikwo-elisyon:Li ka ogmante konsantrasyon nan ADN jenomik, ki se pratik pou deteksyon en oswa eksperyans.
Deskripsyon
Twous sa a bay yon metòd efikas ak rapid pou jwenn ADN jenomik ki gen gwo konsantrasyon nan prelèvman nan bouch ak kat FTA (tach san).Sèvi ak konpayi nou an's inik ADN-sèlman silica manbràn vire kolòn ak fòmil, konbine avèk Foregene Protease, wo-konsantrasyon,-wo kalite ADN genomik ka ekstrè nan 80 minit.Ti kolòn pou pirifye ki fèt espesyalman la mare ADN jenomik, epi ADN an ka elimine ak yon ti kantite (15μl) sistèm elisyon pou ogmante konsantrasyon ADN genomik yo jwenn, ki se pratik pou deteksyon en oswa eksperyans.Twous la ka trete youn oswa plis echantiyon nan yon moman, ak pwosesis pou pirifye a pa mande pou fè ekstraksyon nan sibstans ki sou òganik tankou fenol, klowofòm, ak tan konsome izopropanol oswa presipitasyon etanòl, ak operasyon an se senp epi ekonomize tan.
Espesifikasyon
50 preparasyon
Konpozan twous
| Tanpon ST1 |
| Tanpon ST2 |
| Akrilamid lineyè |
| Tanpon PW |
| Tanpon WB |
| Tanpon EB |
| Foregene Proteaz |
| Kolòn ADN sèlman |
| Enstriksyon yo |
Karakteristik & avantaj
-Pa gen kontaminasyon RNase: Kolòn ADN sèlman ki bay nan twous la fè li posib pou retire RNA nan ADN jenomik san yo pa ajoute RNase pandan eksperyans la, evite laboratwa a kontamine pa RNase ekzojèn.
-Vitès vit: Foregene Protease gen pi wo aktivite pase proteaz menm jan an, dijere echantiyon yo byen vit;operasyon senp.
-Pran: Santrifijasyon an fèt nan tanperati chanm, epi pa gen okenn nesesite pou santrifujasyon ba-tanperati 4 °C oswa presipitasyon etanòl nan ADN.
-Sekirite: Pa gen okenn ekstraksyon reyaktif òganik obligatwa.
-Segondè bon jan kalite: ADN jenomik ekstrè a gen fragman gwo, pa gen okenn RNA, pa gen okenn RNase, ak kontni ion ki ba anpil, ki ka satisfè kondisyon ki nan eksperyans divès kalite.
-Micro-elisyon sistèm: Li ka ogmante konsantrasyon nan ADN jenomik, ki se pratik pou deteksyon en oswa eksperyans.
Aplikasyon pou twous
Li apwopriye pou pirifye ADN jenomik nan echantiyon sa yo: prelèvman nan bouch, kat FTA (tach san).
Depo ak etajè lavi
-Tout sa a ka estoke pou 12 mwa anba kondisyon sèk nan tanperati chanm (15-25 ° C);si li bezwen estoke pou yon peryòd tan ki pi long, li ka estoke nan 2-8 ° C.
Remak: Si yo estoke nan tanperati ki ba, solisyon an gen tandans fè presipitasyon.Anvan w itilize, asire w ke w mete solisyon an nan twous lan nan tanperati chanm pou yon peryòd de tan.Si sa nesesè, prechofe li nan yon beny dlo 37 ° C pou 10 minit pou fonn presipite a, epi melanje li anvan ou itilize.
-Foregene Protease solisyon gen yon fòmil inik, ki aktif lè yo estoke nan tanperati chanm pou yon tan long (3 mwa);aktivite li ak estabilite pral pi bon lè yo estoke nan 4 ° C, kidonk li rekòmande pou estoke li nan 4 ° C, sonje pa kenbe li nan -20 ° C.
Kolòn pou pirifye a bouche
Nan twous sa a, nan operasyon ekstraksyon ADN jenomik la, kolòn pirifikasyon an dirèkteman adsorbed sou echantiyon liz anzimatik melanj san etap santrifujasyon an, epi kolòn pirifikasyon an ka bloke akòz enzymizasyon enkonplè ak gwo viskozite echantiyon an.
Kòz posib sa yo se jan sa a:
1. Enkonplè dijesyon anzimatik nan echantiyon tisi.
Rekòmandasyon: Tan pwosesis echantiyon Foregene Protease ka pwolonje kòmsadwa oswa sipènatant la ka pran apre santrifujasyon nan 12,000 rpm (~13,400 × g) pou 5 min.
2. Twòp itilizasyon echantiyon tisi oswa tisi gwo.
Rekòmandasyon: Li pi bon pou pa depase 1 prelèvman Buccal nan echantiyon an;si echantiyon an twò gwo, ogmante dòz tanpon ST1, Foregene Protease, tanpon ST2 kòmsadwa.
3. Viskozite echantiyon an twò wo.
Rekòmandasyon: Echantiyon yo ka dilye kòmsadwa avèk 10 mM Tris-HCl anvan ekstraksyon ADN jenomik.
4. Fragman kat san yo te aspire.
Rekòmandasyon: Tan santrifujasyon pasajè etap 6 nan ekstraksyon jenomik tach san (FTA Card) ka pwolonje yon fason ki apwopriye.
Sede ki ba oswa pa gen ADN
Gen souvan yon varyete de faktè ki afekte pwodiksyon ADN jenomik, ki gen ladan orijin echantiyon, kondisyon depo echantiyon, preparasyon echantiyon, manipilasyon, elatriye.
ADN jenomik pa ka jwenn pandan ekstraksyon
Kòz posib yo se jan sa a:
1. Move prezèvasyon echantiyon oswa depo pou twò lontan mennen nan degradasyon ADN jenomik.
Rekòmandasyon: Prelèvman oral yo ta dwe fèk pran echantiyon, epi li pa rekòmande pou itilize prelèvman konsève pou operasyon ekstraksyon ADN jenomik;echantiyon tach san yo ta dwe asire ke bon jan kalite a kalifye ak tan an depo pa ta dwe twò lontan.
2. Twòp tisi itilizasyon ka lakòz okenn ekstraksyon ADN jenomik ki koresponn lan.
Rekòmandasyon: Swiv enstriksyon pou pran echantiyon bukal la nan gid operasyon an, epi siye anpil fwa ke posib pou ase selil yo ka tache ak prelèvman oral la pou fè ekstraksyon ADN jenomik;pou fè ekstraksyon echantiyon tach san, zòn nan koupe tach san ka yon fason apwopriye ogmante.
3. Foregene Protease mal konsève, sa ki lakòz yon diminisyon nan aktivite li oswa inaktivasyon.
Rekòmandasyon: Konfime kondisyon depo Foregene Protease a oswa ranplase li ak yon nouvo Foregene Protease pou reyaksyon anzimatik.
4. Konsèvasyon move twous la oswa tan depo twò lontan, sa ki lakòz echèk kèk eleman nan twous la.
Rekòmandasyon: Achte yon nouvo twous izolasyon ADN Buccal prelèvman pou pwosedi ki gen rapò.
5. Tanpon WB pa ajoute etanòl absoli.
Rekòmandasyon: Konfime ke tanpon WB ajoute volim ki kòrèk la nan etanòl absoli.
6. Eluent a pa kòrèkteman ajoute nan fim nan silikone.
Rekòmandasyon: Ajoute 65 °C pre-chofe gout eluyan nan mitan an nan manbràn silikone a epi kite nan tanperati chanm pou 5 min ogmante efikasite elisyon an.
ADN jenomik ki ba-rande izole
Kòz posib sa yo se jan sa a:
1. Move prezèvasyon echantiyon oswa depo pou twò lontan mennen nan degradasyon ADN jenomik.
Rekòmandasyon: Prelèvman oral yo ta dwe fèk pran echantiyon, epi yo pa ta dwe itilize prelèvman konsève pou fè ekstraksyon ADN jenomik.
2. Si kantite echantiyon tisi a twò piti, kontni ADN jenomik ekstrè a pral mwens.
Rekòmandasyon: Swiv enstriksyon echantiyon prelèvman oral yo nan gid fonksyònman an, siye anpil fwa ke posib pou ase selil yo ka tache ak prelèvman oral la pou fè ekstraksyon ADN jenomik.
3. Foregene Protease mal konsève, sa ki lakòz yon diminisyon nan aktivite li oswa inaktivasyon.
Rekòmandasyon: Konfime kondisyon depo Foregene Protease a oswa ranplase li ak yon nouvo Foregene Protease pou reyaksyon anzimatik.
4. Pwoblèm Eluent.
Rekòmandasyon: Sèvi ak tanpon EB pou elisyon;si w ap itilize ddH2O oswa lòt eluyan, konfime ke pH eluate a se ant 7.0-8.5.
5. Eluate a pa kòrèkteman ajoute gout.
Rekòmandasyon: Ajoute gout eluyan nan mitan manbràn silikone a epi kite nan tanperati chanm pou 5 minit pou ogmante efikasite elisyon.
6. Likid elisyon an akimile twò piti.
Rekòmandasyon: Sèvi ak eluyan pou elisyon ADN jenomik jan sa nesesè nan enstriksyon yo, omwen pa mwens pase 15 μl.
Ba pite nan ADN jenomik izole
Pite ADN genomik ki ba ka mennen nan echèk oswa rezilta satisfezan nan eksperyans en, tankou: anzim pa ka koupe louvri, PCR pa ka jwenn fragman nan jèn nan enterè, elatriye.
Kòz posib yo se jan sa a:
1. Polisyon eteroprotein, polisyon RNA.
Analiz: Kolòn pou pirifye a pa te lave lè l sèvi avèk tanpon PW;kolòn pou pirifye lave tanpon PW la pa te lave lè l sèvi avèk vitès santrifujeur kòrèk la.
Rekòmandasyon: Asire w ke pa gen presipitasyon nan supernatant la anvan ou ajoute etanòl;asire w ke ou lave kolòn pou pirifye a dapre enstriksyon yo, epi etap sa a pa ka omisyon.
2. Enpurte ion polisyon.
Analiz: Kolòn pou pirifye lave tanpon WB te omisyon oswa lave sèlman yon fwa, sa ki lakòz kontaminasyon iyonik rezidyèl.
Rekòmandasyon: Asire w ke w lave Buffer WB 2 fwa jan yo di l pou retire iyon rezidyèl yo otank posib.
3. RNA anzim kontaminasyon.
Analiz: RNases etranje yo te ajoute nan tanpon;Operasyon lave tanpon PW pa te kòrèk, sa ki lakòz résidus RNase, ki afekte operasyon eksperimantal RNA en, tankou transkripsyon vitro.
Rekòmandasyon: Twous izolasyon asid nikleyik seri Foregene yo ka retire RNA san adisyon adisyonèl nan RNaz, kidonk twous izolasyon ADN nan kat FTA nan bouch/FTA pa bezwen ajoute RNase;asire w ke ou swiv enstriksyon yo pou kolòn pou pirifye lave tanpon PW, epi etap sa a pa ka omisyon.
4. Etanòl rezidi.
Analiz: Tanpon WB pa t 'fè santrifujasyon tib vid apre lave kolòn nan pirifikasyon.
Rekòmandasyon: Fè operasyon santrifujasyon tib vid ki kòrèk la dapre enstriksyon yo.
5. Lòt polisyon enpurte.
Analiz: Echantiyon sove oswa echantiyon espesyal yo pa pretrete.
Rekòmandasyon: Byen trete echantiyon an jan yo mande yo.
