• facebook
  • linkedin
  • youtube

Rapò ki ba nan A260 / A230 anjeneral ki te koze pa enpurte ak longèdonn maksimòm absòpsyon nan 230nm.Ann wè ki sa enpurte sa yo enkli:

  • Polyan komen

    Absòpsyon longèdonn

    Efè rapò

    Pwoteyin

    ~ 230nm ak 280nm

    Rediksyon similtane nan A260/A 280ak A260/A 280rapò

    Gwanidin sèl

    220-240 nm

    Diminye A260/A 280rapò

    Fenol

    ~ 270nm

    -

    Trizol

    ~ 230nm ak 270nm

    Diminye A260/A 280rapò

    EDTA

    ~230nm

    Diminye A260/A 280rapò

    Etanòl

    230-240 nm

    Diminye A260/A 280rapò

 
 
 
Longèdonn absòpsyon ak valè kontras nan polyan komen

Pkontaminasyon rotein
Polisyon Pwoteyin ka konsidere kòm polisyon ki pi komen nan pwosesis ekstraksyon asid nikleyik la.Pwoteyin egziste ant faz akeuz anwo a ak pi ba aòganikfaz.Polisyon ap redwi rapò A260/A280 ak A260/A230 an menm tan, ak rapò A260/A230 ap chanje plis evidan pase rapò A260/A280.
Pandan ki vin apretranskripsyon ranvèseor reyaksyon qPCR, rezidi pwoteyin yo ka anpeche oswa entèfere ak fonksyon anzim.Pi bon fason pou evite kontaminasyon pwoteyin se kenbe nan tèt ou prensip la nan "olye mwens pase plis, yon ti kantite anpil fwa" lè aspirasyon supernatant la.

2. Polisyon Guanidinium
idroklorid (GuHCl) ak guanidine thiocyanate (GTC) gen efè pwoteyin denaturasyon, ki ka byen vit detwi manbràn selilè pandan pwosesis ekstraksyon asid nikleyik, sa ki lakòz denaturasyon pwoteyin ak presipitasyon.Longèdonn absòpsyon GuHCl ak GTC se ant 220-240 nm, aksèl guanidinium rezidyèl ap diminye rapò a nan A260 / A230.Malgre ke sèl guanidinium rezidyèl la ap diminye rapò a,enpak la sou eksperyans en se aktyèlman neglijab.

3. Kontaminasyon trizol
Eleman prensipal la nan Trizol se fenol.Fonksyon prensipal fenol se lise selil yo epi lage pwoteyin ak sibstans asid nikleyik nan selil yo.Malgre ke fenol ka efektivman denatire pwoteyin, li pa ka konplètman anpeche aktivite RNase.Se poutèt sa, 8-hydroxyquinoline, guanidine isothiocyanate, β-mercaptoethanol, elatriye yo ajoute nan TRIzol pou anpeche RNase andojèn ak ekzojèn.
Lè ekstrè selilè RNA, Trizol ka rapidman lyse selil yo epi anpeche nuclease lage nan selil yo, ak Trizol rezidyèl la pral siyifikativman diminye rapò A260 / A230.
Pwosesis metòd: Lè santrifuje, li dwe remake ke fenol la nan Trizol fasil idrosolubl nan faz dlo a anba kondisyon an nan 4 ° ak tanperati chanm.

4. Etanòl rezidi
Etanòl yo itilize nan pwosesis final la pou presipite ADN la pandan y ap fonn iyon sèl ki ka mare ak ADN la.Longèdonn absòpsyon ki pi wo apik absòpsyon nanetanòl tou se nan 230-240 nm, kipral tou redwi rapò a nan A260 / A230.
Metòd la pou evite rezidi etanòl ka repete de fwa pandan elisyon final la, mouche nanhotte afimenpou de minit pou pèmèt etanòl la konplètman evapore anvan ou ajoute tanpon pou elisyon.
Sepandan, li ta dwe konnen ke rapò a se sèlman yon endèks evalyasyon nan bon jan kalite RNA.Si operasyon yo mansyone anwo yo entèdi reglemante, devyasyon ant rapò a ak seri estanda a pa pral gen yon gwo enpak sou eksperyans en.
Pwodwi ki gen rapò:
Animal total RNA izole twous
Twous Izolasyon RNA Total Plant
Twous izolasyon RNA total selilè
Plant Total RNA Isolation kit Plus


Tan pòs: Feb-10-2023