Twous ForeDirect RT-qPCR
Deskripsyon
Twous ForeDirect RT-qPCR fèt pou anplifikasyon dirèk RNA an tan reyèl nan koleksyon prelèvman san pwosesis pou pirifye RNA.Twous sa a konplete sik qRT-PCR yo nan yon èdtan.Melanj anzim lan se yon melanj optimisé de Transcriptase inverse, Hot-Start Taq DNA polymerase, inhibiteur RNase.Tanpon Reyaksyon an gen tout eleman ki nesesè yo, ki gen ladan konpozan tanpon optimize, Mg2+, dUTP, ak dNTPs.
Espesifikasyon
100T
Konpozan twous
Ajan pou lage asid nikleik |
Pwoteksyon RNA |
2 × RT-qPCR tanpon |
Melanj anzim (Taq & M-MLV) |
Enstriksyon yo |
Aplikasyon PCR
1. Yon fwa tib reyaksyon PCR yo te santrifuje yon ti tan, mete yo nan tank echantiyon enstriman anplifikasyon an.
2. Pwotokòl tèmik
Etap | Tanperati | Tan | Sik | |
1 | Ranvèse transcription | 50℃ | 15 minit | 1 |
2 | Pre-denaturasyon | 95℃ | 1 min | 1 |
3 | Denaturasyon | 95℃ | 10 segonn | 42 |
4 | Anneal / Ekstansyon | 60℃ | 30 segonn |
Remak:Siyal fliyoresan te detekte imedyatman apre etap ekstansyon chak sik.
3. Apre mete, sove fichye a epi kouri pwogram reyaksyon an.
Etap opere
Anvan preparasyon reyaktif, tout reyaktif nan twous la ta dwe dekonjle nan tanperati chanm ak melanje dousman.
Preparasyon reyaktif
1. Prepare melanj lage asid nikleik la
Eleman | Volim pou chak echantiyon oswa kontwòl |
Ajan pou lage asid nikleik | 5μL |
Pwoteksyon RNA | 0.5 μL |
2. Prepare melanj reyaksyon an
Eleman | Volim pou chak echantiyon oswa kontwòl |
2 × RT-qPCR tanpon | 15 μL |
Melanj anzim (Taq & M-MLV) | 1.5 μL |
Prensipal ak Sond | 1μL |
Depo ak etajè lavi
-Tout la ta dwe estoke nan -20± 5℃.Peryòd validite a se 12 mwa.
-Evite repete sik friz-dekonjle (<5 sik).