Dirèk RT-qPCR Twous
Deskripsyon Kit:
◮ Dirèk RT-qPCR Twous, lè l sèvi avèk Foreasy Reverse Transcriptase ak Foreasy HS Taq DNA Polymerase devlope pa Foregene, ak tanpon reyaksyon inik, fè twous sa a ak rezistans fò ak konpatibilite, epi li ka dirèkteman teste reyaksyon itilize Foregene Lysis sistèm kòm modèl.Twous sa a ka aplike pou twous deteksyon asid nikleyik COVID-19 ak devlopman twous deteksyon asid nikleyik lòt bakteri patojèn.
Deskripsyon
Direct RT-qPCR Twous bay tanpon RT-qPCR ki pake separeman ak anzim efikas segondè.melanj (Taq、M-MLV、RI), fè li pratik pou kreye twous back-end ak sistèmajisteman, nan verifikasyon senp.
Espesifikasyon
500T, 50,000T
Konpozan twous
| Kit sa yo (20 μL sistèm reyaksyon) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50,000 T | |
| Melanj anzim dirèk | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
| 2 × dirèk RT-qPCR tanpon | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Enstriksyon | 1 | 1 |
Etap opere
Anvan preparasyon reyaktif, tout reyaktif nan twous la ta dwe dekonjle nan tanperati chanm ak melanje dousman.
A: Prepare of modèl epi reyaktif
1. Prepare modèl RNA prepare (Li rekòmande pou itilize Foregene Total RNA Isolation Kit seri twous pou ekstrè ak pirifye modèl RNA) oswa echantiyon pwodwi fann (Li rekòmande pou itilize sistèm Foregene Lysis), primè espesifik (10 μM) ak lòt consommables ki enpòtan, enstriman.
2. Mete 2 × Tanpon RT-qPCR dirèk la, RNase-Free ddH2O ak 20 × ROX Referans Dye (si li's nesesè) nan bwat la ak glas, fè sa yo fonn natirèlman, ak melanje dousman.
B: Prepare of RT-qPCR sistèm
Tablo 1 : Prepare of RT-qPCR ssistèm
| Eleman | Volim | Final konsantrasyon |
| 2 × dirèk RT-qPCR tanpon | 10 μL | 1× |
| Melanj anzim dirèk | 1μL | |
| Pi devan (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Reverse Primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Sonde (4 μM) | 1μL | 200nM |
| Modèl (RNA oswa Lysate) | X μL | |
| 20 × ROX Referans Dye | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| Volim Total | 20μL |
C: Mete la RT-qPCR reyaksyon pwogram
Tablo 2 : RT-qPCR reyajion pwogram anviwònman (pou egzanp: de-etap metòd)
| Etap | Tanperati | Tan | Sik | Kontni | |
| 1 | 50℃ | 15 min | 1* | 1 | Ranvèse transcription |
| 2 | 95℃ | 1 min | 1 | Pre-denaturasyon | |
| 3 | 95℃ | 10 sec | 40-45 | Denaturasyon | |
| 60℃ | 30 sec 2* | Anneal / Ekstansyon | |||
Depo ak etajè lavi
-Tout la ta dwe estoke nan -20± 5℃.Peryòd validite a se 12 mwa.
-Evite repete sik friz-dekonjle (<5 sik).
